骨髓间充质干细胞培养组织培养的细胞形态求解

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. z3 E6 t# M2 o0 F小鼠的BMSC与大鼠，兔子和人的相比很难养，主要就是纯度难提高，我以前分过别的来源的很好分，分出传代后诱导分化证明纯度很高，但用这一套方法来套小鼠的，就不管用。你看到的大多数悬浮的细胞都不是BMSC，而是血类，造血类细胞，不贴壁。以下几个建议，仅供参考：
$ B/ W' W* ?- x3 U1 小鼠的年龄很重要。不要用中老年鼠，我分的时候用10天左右的。8 I: m% j3 C& k8 P! i, X( O
2 BMSC在骨髓中含量很少，约占骨髓内单核细胞总数的1/104——1/105，加之小鼠股骨和胫骨都非常小，所以给分离带来很大困难。可以一起多分几只老鼠，但要避免污染。+ w2 d) d% N" c8 N
3 将细胞悬液铺到培养板后，随着培养换液，最初会有少量的细胞贴壁，随着时间的延长，会有单个克隆的出现，这步很重要。; _3 m0 k3 |3 q
4 挑取克隆到培养孔中，继续培养。
4 Y# ~  c# g9 F" x: |5 BMSC有成克隆的能力，但形成的克隆不都是BMSC，所以需要分化鉴定等。6 j' k$ z% \6 O  k  Y/ l# z  G( H
这样，就可以获得纯度很高的BMSC。还有一点，BMSC好消化，如果传代过程中消化不下来的细胞就不是BMSC，应弃之。