求助外周血单核细胞诱导ips

ada800515

请问群里有用外周血诱导ips成功的吗？做了很长时间一直没有结果，想找有经验的人指点一下啊。

细胞海洋

回复 cljjj2000 的帖子$ K" `* a% ^: K/ g' E2 ?2 S# R

, l6 T$ A9 l! Y' Q# ?% z建议你发新帖提问

cljjj2000

有没有这方面的protocol呢，指点一下吧。

hkenb

回复 荣荣荣 的帖子
1 J8 r; t3 X9 T3 \0 B3 Q) [" b( u& c7 E6 E  }, h
可以补加condition的培养基，6孔板就可以了，我也是介绍组里他人经验。

荣荣荣

回复 hkenb 的帖子
8 J# E4 v+ ~# r" U5 L& J- X2 `
! D$ l6 s6 p! e- K: K: B0 [) e6 b非常感谢。feeder能坚持那么久么？你一般是用多少的dish做的啊？10 cm能挑出多少个？

hkenb

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细胞量要求不大，视电转效率而定，10左右，具体可能要摸一个梯度。但是电转后种到feeder上，要比MG上好。不要冻存。

荣荣荣

回复 hkenb 的帖子& D# B8 |4 I5 F$ H" F, ]3 g; u  K
) Z" a0 t1 r) e% m( C9 O2 v; p
请教一下一般用多少血来分离多少单核细胞出来够做iPS的？如果选出CD34+，细胞量要很大吧？分离出来可以冻存么？

hkenb

回复 yaolinzhang 的帖子/ |6 w- J% A* u  t

  r; i( [+ C  U0 v0 g$ C不用扩增，不过细胞量要比较大，采用电转非整合载体的方法，之后种feeder上诱导。

yaolinzhang

你做过吗？是直接诱导还是先扩增后诱导；我也做了好长时间了，还没结果呢！

yaolinzhang

你做过吗？是直接诱导还是先扩增后诱导；我也做了好长时间了，还没结果呢！