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求如何提高H1的贴比率 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-7-20 17:35 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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求如何提高H1的贴比率
2 c' V% C" X6 Q! O  d8 U/ r    目前我用的是matrigel包被的板子,培养基是用的mTeSR,采用的方法是用dispase消化7min 细胞卷边后用10ml移液管来回刮,再轻轻吹散后分散到37度预热1小时的matrigel板子,但是每次传代后,第二天发现有很多集落没有贴壁,贴比率估计是20%左右。如何提高我的贴比率?看别人做贴壁率很高,有什么方法提高贴比率?
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沙发
发表于 2012-7-20 22:37 |只看该作者
Dispase用两乘的消化,大概三分钟就可以,此时可以看到克隆边缘稍微卷边,即可。如果是同样的酶活的话,消化7分钟有点久。
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藤椅
发表于 2012-7-22 14:30 |只看该作者
用的dispase是1mg/ml的,细胞集落比较大的时候就消化7min,但是结果好像还是贴壁率不怎么高。
8 M7 u( h# p3 ~2 }( U
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发表于 2012-7-25 22:37 |只看该作者
回复 lchoxy 的帖子3 W' e0 D$ @7 P6 r2 A; g: c6 E" L

. G5 ~9 h/ Y1 ?: i1 i7 M  Y别把克隆吹的太小  大的克隆好贴一些  另外可以考虑使用Y27632
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发表于 2012-7-25 23:04 |只看该作者
谢谢
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发表于 2012-7-30 11:22 |只看该作者
回复 lchoxy 的帖子
& ^7 e% `! j5 f% i" N1 h! K' H: M$ X2 `9 T% _* [; J, @1 h5 x
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
, f1 [) N5 O6 Q- S* h0 m- {7 P1 W& |3 T1 E1 \) W  z- |/ W3 ?
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