求如何提高H1的贴比率

lchoxy

求如何提高H1的贴比率
# U' _2 _8 U7 G! |( Z    目前我用的是matrigel包被的板子，培养基是用的mTeSR，采用的方法是用dispase消化7min 细胞卷边后用10ml移液管来回刮，再轻轻吹散后分散到37度预热1小时的matrigel板子，但是每次传代后，第二天发现有很多集落没有贴壁，贴比率估计是20%左右。如何提高我的贴比率？看别人做贴壁率很高，有什么方法提高贴比率？

hkenb

Dispase用两乘的消化，大概三分钟就可以，此时可以看到克隆边缘稍微卷边，即可。如果是同样的酶活的话，消化7分钟有点久。

lchoxy

用的dispase是1mg/ml的，细胞集落比较大的时候就消化7min，但是结果好像还是贴壁率不怎么高。
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fish_zbw1985

回复 lchoxy 的帖子, O+ P  z3 j0 F1 A/ H# f9 V

5 o$ h, }# J3 I" C别把克隆吹的太小  大的克隆好贴一些  另外可以考虑使用Y27632

lchoxy

谢谢
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细胞海洋

回复 lchoxy 的帖子& A- ]. @  I" t9 p

- f6 ]  p. v2 W# Y% K. }你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样9 g) U3 U8 _% @, h" ?

7 n1 L9 i6 j9 e: Y+ ^8 `否则他会看不到