再发图！用Ficoll分离脐血后的效果（15ml和50ml离心管）

huajie881026

透明之蓝 发表于 2012-8-7 16:41 8 a+ r8 ]) V5 A2 C! o
同样的分离液，15cm的肯定分离效果更好。
# c+ j5 x1 G" f) z6 c肯花2000元买分离液，看来你是在搞科研，而且，脐血的MSC含量 ...

9 X4 V* ~* G. c2 n) F出来了一点梭型细胞（有待鉴定），但是杂细胞很多! M/ r5 m; H& B1 j2 p
http://www.stemcell8.cn/thread-59259-1-1.html

huajie881026

vanessa 发表于 2012-8-8 16:37
7 j" S' B) Z( Z6 W你用的Ficoll也太多了吧。我们一般稀释过的血：Ficoll=2：1.我觉得操作的时候注意缓慢将稀释后的血细胞加入 ...

; t) C5 E3 W+ J5 \
因为说明书和论坛里都是这么做的，我也想省点ficoll，以后我就按你的比例吧。。。

vanessa

你用的Ficoll也太多了吧。我们一般稀释过的血：Ficoll=2：1.我觉得操作的时候注意缓慢将稀释后的血细胞加入到Ficoll中。加入之后尽快的离心，离心的时候升速和降速都慢点，应该会好点

huajie881026

pailishi 发表于 2012-8-8 10:45
9 P# q- |. @. I8 g有一个带视频的关于外周血大量扩增EPC的文章吧，有点难度

# M2 u1 H7 d; [, D' s5 w刚搜了下JOVE，看了那个视频，震惊了，最后她用的扩增细胞的培养容器也太大了点了吧！不过她说成功率有50%-70%，只是主要取决于供体血中有无EPC。
( V9 ~$ T+ `* N' c% U! f4 P以后如果我也要养EPC，还望你指点啊！

pailishi

有一个带视频的关于外周血大量扩增EPC的文章吧，有点难度

pailishi

呵呵，我们还是想要脐血EPC，主要是MSC克隆污染的问题，其他还好，不过有点觉得EGM-2的质量不稳定

huajie881026

pailishi 发表于 2012-8-8 09:03
! Q& |2 M( g3 p, [8 w% kEGM-2用的就是商品化的成品，相关因子和血清都是配套好了的哦% I$ P5 v' y+ n7 U
脐带里面的指的是脐静脉内皮细胞吗？外周血E ...

' u9 P, P; f8 x" c9 g+ o9 Y嗯，就是指脐静脉血管内皮祖细胞。外周血的EPC含量的确比较低，不过我印象中看到一篇奥地利的文献是关于外周血大量扩增EPC的，现在一时找不到了。。。

pailishi

EGM-2用的就是商品化的成品，相关因子和血清都是配套好了的哦
5 i0 n8 i- H4 B" `$ I" e脐带里面的指的是脐静脉内皮细胞吗？外周血EPC含量太低，很难养出来

huajie881026

pailishi 发表于 2012-8-7 17:13 5 V7 _' y8 M* G6 o. Q6 C  P) u# Q& ?
我跟你一样分的，但是我用EGM-2要养的是EPC ，最可恨的是经常被MSC克隆污染，而且这个MSC克隆增殖奇快无比， ...

: _# h1 F- E8 s4 _8 n( I) U5 J" KMSC在EGM-2里养的活？其实应该养的活，只要血清好。* S0 M* X/ h- s9 h/ l3 u, k1 l
你养EPC可以试试脐带的或者外周血的嘛！那样被MSC污染会低一点！
" B1 r' c1 _) P, f9 n, @2 T! B哦  对了  你用的EGM-2里加什么生长因子吗？血清用的啥牌子的？我以后可能会要养EPC
' |2 M' S) W; Q- G  V请教了！

pailishi

我跟你一样分的，但是我用EGM-2要养的是EPC ，最可恨的是经常被MSC克隆污染，而且这个MSC克隆增殖奇快无比，头痛！！！