再发图！用Ficoll分离脐血后的效果（15ml和50ml离心管）

huajie881026

前不久，做脐血MSC分离，用50ml离心管分离后，白膜层不清晰，故发了一帖http://www.stemcell8.cn/thread-58525-1-1.html" |& T2 V" R: E' a6 L( r( d+ A
昨日又做了一次，分别用50ml和15ml离心管都做了，还是按Ficoll说明书来，500g  20℃  30分钟，结果50ml管还是“白雾”层，15ml就是大家所谓的“白膜”层（下图），可见是离心管的不同导致了分离后分层的区别。
* ~& |: v& x9 t可问题又来了，我100ml脐血，用100mlPBS稀释，再用100mlFicoll分离，这得要20个15ml离心管来分离啊，这得多浪费啊。不管怎么样，我还是用50ml的离心管先做了，我相信能得到MSC！！！
& R* P/ r0 a* k0 r( t: e, N  L# J, ]( K9 u* {2 O. y6 G

帝国黑骑士

回复 huajie881026 的帖子8 o! w  o2 \: @: s4 K3 B" v
, S7 ]( h, N" }0 ?
我觉的 用50ml 的离心管离心是的离心力可以再大一点，可能会好一些！比如700g ！个人觉得。

lm310389487

经验：离心力稍微调大些效果更好，大概就700g吧

huajie881026

嗯  下次我再改进，用700g以上再试试。
, S  b- P) W2 P9 f8 w/ H我一直用500g，30min，一方面是Ficoll说明书上这么说，一方面是下面一篇文献上也是这么做的7 ^: \5 c: J3 E8 x7 P% t/ _
他做了四百多分脐血，最后发现＞90ml脐血和2小时内操作是成功的关键5 c" c* X/ C0 c" L9 Y+ R, ~/ P! d6 ]

xuehu20

回复 huajie881026 的帖子
  i5 o1 z4 H  N# f# M
2 l. H# y. c9 X+ M5 m: \! f你好，请问你说的文献有原文吗，能给我一份吗，谢谢

sdwzg119

Ficoll是国产的还是进口的？？我对比过国产淋巴细胞分离液和进口的之间的区别，进口的明显比国产的好的多！！粗略算算，大约进口的能比国产的得到多50%的细胞

huajie881026

sdwzg119 发表于 2012-8-2 14:56
2 a$ Z; O$ Y( b( F, N% p/ H! fFicoll是国产的还是进口的？？我对比过国产淋巴细胞分离液和进口的之间的区别，进口的明显比国产的好的多！ ...

7 M5 a* ?$ X# [4 \5 a* N* F# F4 }, R! S进口的，GE的，2000+才600ml，分一次要用100ml，所以分一次心疼啊

huajie881026

xuehu20 发表于 2012-8-2 14:48
$ r- R" B3 _/ b/ G回复 huajie881026 的帖子
& X4 S: T& y1 `( m! h. F  o5 A
. ^+ z, D, ]& P0 }! M你好，请问你说的文献有原文吗，能给我一份吗，谢谢

3 i; g: |( `5 e$ f
此贴可下载+ m5 v) ^% T1 m$ G) c
http://www.stemcell8.cn/thread-58705-1-1.html

542177563

回复 huajie881026 的帖子: W/ u: h9 L& }: R! J

, @: S3 p" h# R  T3 d8 F( O& U! r学习中

透明之蓝

3 C; `% O& {8 N7 u9 b. X- q+ X

huajie881026 发表于 2012-8-2 10:38
8 l0 K8 [: D  D; g6 y前不久，做脐血MSC分离，用50ml离心管分离后，白膜层不清晰，故发了一帖http://www.stemcell8.cn/thread-58 ...

3 u4 q1 J  G! x7 I
! Y+ A8 J3 Q' |  A- d# m同样的分离液，15cm的肯定分离效果更好。
" p/ u1 x1 y) f5 ]: F肯花2000元买分离液，看来你是在搞科研，而且，脐血的MSC含量少不好养出来，综合你的情况，还是用15cm的吧！
& G7 u7 @& I# U
' m) ]$ d6 q3 \5 w$ C- r0 q( H' v, FBy the way：养出来了通知一下，呵呵，我曾养过几次，情况都不好！祝好运！