再发图！用Ficoll分离脐血后的效果（15ml和50ml离心管）

qiugt0819

我最近也在用ficoll液分离minipig的骨髓间充质干细胞，目前也遇到了分层不清晰的情况，还在摸索中~

fenglinzhu

当然是用15ml的离心管效果好啊。但是之前我也看到人家分离外周血免疫细胞的时候用50ml的离心管分离的，他们好像稀释倍数蛮高的，而且他们好像只装40ml吧。500g离心30min，减速度调到0，效果比你的好多了的。你的分离效果不好可能就是你稀释倍数太少的原因吧，浓度过高的话分离效果肯定不行的。我之前做的是间充质干细胞的分离，也是稀释很多倍的，但我们用的是percoll,15ml离心管，离心20min，效果很好。

cjsbaicai

我觉得15ml效果好就用15ml的，50ml做了，到时候纯度等其他不确定因素会影响你后续试验，那也挺不值的

qiugt0819

想问一下楼主白膜层是刻度7cm和8cm之间有点带红那部分吗？？？

huajie881026

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. o9 x8 d8 j# \4 H7 |1 B4 D. H$ S5 G
是的，红色的点可能是血小板，因为血小板也在血清与ficoll之间！

huajie881026

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hUCB-MSCs（如下图）
8 w. a: r2 L) N* A. ^* Z# ~3 b
养了四份脐血就成功这么一次！

ditiger

可以试一下先甲基纤维素沉降，再ficoll离心，效果会好很多~~

crazytime

不同脐带血的差异很大，这份脐带血的分离后，红细胞层有点厚了，可以试着多加一点PBS

透明之蓝

回复 huajie881026 的帖子% O. K- i% m" A
9 R$ E3 `( u: y* }- z' X0 {
恭喜！！！