如果引物中间有3个碱基不配对的，还可以扩出来吗

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哥们，是做点突变吧？如果是点突变的话，我可以分享一下：我做过连续两个位点突变的，挺成功。
2 E2 e# e: j' y1.注意引物的长度在30bp左右；
- V: \" p  ]; ~; [& q. F6 h$ `2.突变位点在中间偏后，也就是稍靠近5‘端;6 ~6 j; A" k+ p/ x( Q. l1 j# b4 G
3.不要用高保真的酶，普通的酶就行。