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[讨论] 拿小鼠的基因表达序列转染大鼠细胞,这样能行吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-8-13 17:17 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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问题,这样的做法,国外能接受吗?# z& P& o' }- ]3 r4 k
$ g9 h. V  K6 g; G' _; t+ |
如果不考虑,细胞移植后免疫反应,就体外实验而言,这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞?
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12楼
发表于 2012-8-31 00:35 |只看该作者
回复 wiling123 的帖子
7 G, ]: `! ~4 a7 V- h% Y/ h) J# m- T9 Z9 ~" ^7 K! i8 a
基因的表达理论上是没有选择性的,只要你有合适的启动子和终止子;但是表达后的影响就不一样了,如果你这个蛋白是小鼠跟大鼠都有的蛋白可能问题不大,但如果是差异蛋白就不好说了
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11楼
发表于 2012-8-16 18:37 |只看该作者
回复 shy8610 的帖子
7 q, i3 Y2 U2 c; e( ^2 W; g5 a- O% c: K  }+ s3 L. n( f
分离的原代

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10楼
发表于 2012-8-16 18:36 |只看该作者
回复 shy8610 的帖子$ x* l7 k9 q9 F" E

1 h+ T! O8 L+ f0 c0 h大鼠脂肪干细胞。

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9楼
发表于 2012-8-16 09:14 |只看该作者
回复 wiling123 的帖子: `1 Z  \' S. h5 l; m0 i7 H# i6 t9 M

7 V4 T; R; O$ v小鼠细胞不好养吗?不知道wiling123的细胞是哪种?应该不会啊,是已经成细胞系了还是原代分离的?

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8楼
发表于 2012-8-15 13:53 |只看该作者
您好,您的是大鼠的什么细胞,我们最近在做细胞实验,急需大鼠细胞,不知能否馈赠,

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7楼
发表于 2012-8-15 11:25 |只看该作者
回复 lxm5668 的帖子
" l; h1 K$ z% z4 `9 @
! g) s3 |" _/ r- V  G5 Q同源性不低,意思就是说,还是有希望的吗?
+ T  Y2 e4 F3 N
: b" c2 H) z9 Q+ \, N7 o7 w6 k  v因为我手上只有小鼠质粒,而小鼠细胞很不好养,大鼠细胞倒是有,但是大鼠质粒GC含量太高,调取都非常难。
  e9 m; }! R+ F/ l" _* C' g1 U5 K' g. \, F/ p3 L* w; I
那请问,有没有办法去分析这个蛋白的同源性吗?谢谢
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发表于 2012-8-15 10:40 |只看该作者
如果仅仅是细胞转染的话,完全没有问题,我们在体外实验中,经常转来转去,生物界中,病毒入侵就是如此,还是转基因的植物或动物才是,至于影响大鼠体内的生理功能,那得看情况,不知楼主要表述的真实意思是?
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发表于 2012-8-14 07:33 |只看该作者
楼上两位大侠言之极是,无论转染进去什么基因片段,蛋白表达是没有问题的。
9 S) A* q' `! q你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题,是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能,比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话,那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面,毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。

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发表于 2012-8-14 07:33 |只看该作者
楼上两位大侠言之极是,无论转染进去什么基因片段,蛋白表达是没有问题的。
5 d: ~% G) s! ]  z! {- L你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题,是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能,比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话,那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面,毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。
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