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[讨论] 拿小鼠的基因表达序列转染大鼠细胞,这样能行吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-8-13 17:17 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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问题,这样的做法,国外能接受吗?
4 U4 a: G. q- l& E( N' b5 c$ M
0 A# h. s" e3 M( A: o7 h如果不考虑,细胞移植后免疫反应,就体外实验而言,这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞?
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12楼
发表于 2012-8-31 00:35 |只看该作者
回复 wiling123 的帖子
' Y1 W  w# p5 n9 \
' C/ G8 @/ f: i1 h基因的表达理论上是没有选择性的,只要你有合适的启动子和终止子;但是表达后的影响就不一样了,如果你这个蛋白是小鼠跟大鼠都有的蛋白可能问题不大,但如果是差异蛋白就不好说了
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11楼
发表于 2012-8-16 18:37 |只看该作者
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# ?5 P, o' K1 k: e* `# D* ~  k$ W/ P5 A2 a
分离的原代

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10楼
发表于 2012-8-16 18:36 |只看该作者
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1 b$ X+ `+ [. ~$ Y) S4 O% q0 h# y8 Z5 e, }, d1 c& n  h
大鼠脂肪干细胞。

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9楼
发表于 2012-8-16 09:14 |只看该作者
回复 wiling123 的帖子9 e3 y+ N) v- C2 s# `2 b$ k3 q$ N+ G

8 G2 J% A$ I; D5 E小鼠细胞不好养吗?不知道wiling123的细胞是哪种?应该不会啊,是已经成细胞系了还是原代分离的?

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8楼
发表于 2012-8-15 13:53 |只看该作者
您好,您的是大鼠的什么细胞,我们最近在做细胞实验,急需大鼠细胞,不知能否馈赠,

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7楼
发表于 2012-8-15 11:25 |只看该作者
回复 lxm5668 的帖子6 |9 X8 W' k  O3 d

/ G+ s9 `, G8 _& ], ]0 Z同源性不低,意思就是说,还是有希望的吗?, `. P! ^+ r% r8 }7 l2 ]
8 L; E# L  f8 ]- ~4 U
因为我手上只有小鼠质粒,而小鼠细胞很不好养,大鼠细胞倒是有,但是大鼠质粒GC含量太高,调取都非常难。4 z5 L  V" S' c+ [! q. d+ t

1 @) E2 F* v/ c# F* I- m6 D; F那请问,有没有办法去分析这个蛋白的同源性吗?谢谢
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发表于 2012-8-15 10:40 |只看该作者
如果仅仅是细胞转染的话,完全没有问题,我们在体外实验中,经常转来转去,生物界中,病毒入侵就是如此,还是转基因的植物或动物才是,至于影响大鼠体内的生理功能,那得看情况,不知楼主要表述的真实意思是?
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发表于 2012-8-14 07:33 |只看该作者
楼上两位大侠言之极是,无论转染进去什么基因片段,蛋白表达是没有问题的。0 V  X! I  J1 m* C
你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题,是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能,比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话,那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面,毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。

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发表于 2012-8-14 07:33 |只看该作者
楼上两位大侠言之极是,无论转染进去什么基因片段,蛋白表达是没有问题的。( E5 K% ~# P. O' a/ a& G
你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题,是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能,比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话,那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面,毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。
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