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[讨论] 拿小鼠的基因表达序列转染大鼠细胞,这样能行吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-8-13 17:17 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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问题,这样的做法,国外能接受吗?5 Y. N6 S# A- W$ v- o& O
/ D' U, S. c2 T/ y! H1 o
如果不考虑,细胞移植后免疫反应,就体外实验而言,这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞?
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发表于 2012-8-31 00:35 |只看该作者
回复 wiling123 的帖子" k; I) Y4 i, V5 L
9 W4 Q/ D% m1 q$ |: I
基因的表达理论上是没有选择性的,只要你有合适的启动子和终止子;但是表达后的影响就不一样了,如果你这个蛋白是小鼠跟大鼠都有的蛋白可能问题不大,但如果是差异蛋白就不好说了
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发表于 2012-8-16 18:37 |只看该作者
回复 shy8610 的帖子( T% d  ]8 m7 i+ x9 K' ?4 ^
6 k1 `5 C; |% ]5 {0 F" U4 h& r0 j
分离的原代

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发表于 2012-8-16 18:36 |只看该作者
回复 shy8610 的帖子% c9 m& }% N$ `' L3 B

' \* O7 h* {+ I) ~8 e- f7 R大鼠脂肪干细胞。

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发表于 2012-8-16 09:14 |只看该作者
回复 wiling123 的帖子  G8 ?* a9 h7 }6 x7 J

8 l" B& `! f8 B/ j+ ?小鼠细胞不好养吗?不知道wiling123的细胞是哪种?应该不会啊,是已经成细胞系了还是原代分离的?

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发表于 2012-8-15 13:53 |只看该作者
您好,您的是大鼠的什么细胞,我们最近在做细胞实验,急需大鼠细胞,不知能否馈赠,

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发表于 2012-8-15 11:25 |只看该作者
回复 lxm5668 的帖子, o% [4 n+ v: c( P) s( r
3 I0 q1 H2 e) Z; [5 _2 B9 H
同源性不低,意思就是说,还是有希望的吗?: t6 [3 q: y0 Q4 M! a5 T
0 E& d& J/ K8 S# v- V$ M8 Y9 B
因为我手上只有小鼠质粒,而小鼠细胞很不好养,大鼠细胞倒是有,但是大鼠质粒GC含量太高,调取都非常难。& \8 ]. C! E  H
2 e- N2 H" X, X: X9 }3 i
那请问,有没有办法去分析这个蛋白的同源性吗?谢谢
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发表于 2012-8-15 10:40 |只看该作者
如果仅仅是细胞转染的话,完全没有问题,我们在体外实验中,经常转来转去,生物界中,病毒入侵就是如此,还是转基因的植物或动物才是,至于影响大鼠体内的生理功能,那得看情况,不知楼主要表述的真实意思是?
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发表于 2012-8-14 07:33 |只看该作者
楼上两位大侠言之极是,无论转染进去什么基因片段,蛋白表达是没有问题的。
+ K8 N7 E2 ^: G* u0 y你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题,是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能,比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话,那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面,毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。

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发表于 2012-8-14 07:33 |只看该作者
楼上两位大侠言之极是,无论转染进去什么基因片段,蛋白表达是没有问题的。
# ^; z( R7 r4 p  r你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题,是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能,比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话,那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面,毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。
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