做脐带MSC时脐带粘丝状，什么原因？

huajie881026

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2 H$ m3 A; {( `8 S" [7 \  i做了几次脐带原代MSC的分离，今天第一次碰到这种脐带：脐带拿回来3小时开始操作，脐带很粘，即使PBS反复冲洗三次还是很粘，有丝状物。
0 S# H) l& B7 K以前几次脐带都是有点脆脆的，刀划下去很有感觉，这次的却很粘，各位大侠有碰到过这种问题吗？这位产妇有妊娠糖尿病、胎儿出生前因胎窘剖宫产，会是这方面原因吗？/ F# ~9 L$ x, w" Q8 T; s3 w
这样的脐带对分离出MSC有影响吗？
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单个核细胞

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回复 huajie881026 的帖子" X( [; X' ^3 Y) ?# d

; B' B4 ~: T: ?/ _$ s1 c这种情况正常，不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s，会有很大改善。7 W9 S# k% f3 v: t! |# Q2 W! t

8 |$ L1 K* g' A( ]  L另，从照片看楼主的实验物料还需清理干净，注意无菌操作。

蓝O海

从图上看这跟脐带水肿很厉害，这就是脐带粘的主要原因，但是对分离后培养没有太大的影响，估计原代细胞会碎片多一些。多换几次也就行了。
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蓝O海

的确你的实验环境有很大的污染可能性。注意无菌操作啊。

Roden

脐带水肿，细胞爬出受阻小，反而容易成功。

huajie881026

单个核细胞 发表于 2012-8-15 09:22 & O' a! |' l: a" l# Q- ]4 D
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4 o9 H; ?7 O2 N4 e这种情况正常，不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s，会有很大改善 ...

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谢谢提醒，我们的原代超净台的确比较脏，以后会更加注意！

透明之蓝

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呵呵，你要是用过酶消化的方法就知道了，脐带里面很多多糖成分，所以会是这个样子！

huajie881026

回复 透明之蓝 的帖子; g0 r& O. g) u# d5 }3 W3 V

, d1 ?. D* [/ |6 ?" w  J8 g消化法我的确做过，也的确很粘。不过不用消化法这么粘的还是第一次见5 e. j9 Q- E$ Q" M
酶消化法我做了一次没成功，所以没再尝试，你用酶消化法细胞量多吗？

PENGMINLBX

脐带粘  很正常的  对分离没什么影响    如果脐带不肿   可能还会比较好      但是你的操作环境很有问题

透明之蓝

回复 huajie881026 的帖子& u1 t4 s# |' g, o' R  b* i* w
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呵呵，酶消化法，还得加上透明质酸酶，这样就不粘稠了~~+ {) B) p  f! n  X4 r$ c5 F
你要是着急获取细胞，就酶消化，速度快；要是不着急，就可以用组织块贴壁的方法，一块组织块可以重复利用，收获的细胞更多！