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做脐带MSC时脐带粘丝状,什么原因?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-8-15 08:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 huajie881026 于 2012-8-15 08:27 编辑
$ Q$ I3 J0 @/ W+ x2 {: H0 \6 U0 V* Q+ O
做了几次脐带原代MSC的分离,今天第一次碰到这种脐带:脐带拿回来3小时开始操作,脐带很粘,即使PBS反复冲洗三次还是很粘,有丝状物。9 i( _% W5 y* H. W4 A6 J9 O' r7 T
以前几次脐带都是有点脆脆的,刀划下去很有感觉,这次的却很粘,各位大侠有碰到过这种问题吗?这位产妇有妊娠糖尿病、胎儿出生前因胎窘剖宫产,会是这方面原因吗?0 u: @# ?  f" t  U0 \0 D7 x" T* L
这样的脐带对分离出MSC有影响吗?- k3 L7 X  d3 G3 s5 ]
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

沙发
发表于 2012-8-15 09:22 |只看该作者
本帖最后由 单个核细胞 于 2012-8-15 09:24 编辑 & y( d3 s: @' n% A
. D0 H8 w# }$ q5 B0 D
回复 huajie881026 的帖子. ?) U( a& C  |! e9 c
0 N% x4 J9 Q* Z6 T7 q
这种情况正常,不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s,会有很大改善。
* s: Z) h8 Z8 j, R" F/ C# `2 Q$ A: l7 X% L
- A7 v% j0 @+ k! S$ i. n/ ^另,从照片看楼主的实验物料还需清理干净,注意无菌操作。
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藤椅
发表于 2012-8-15 09:29 |只看该作者
从图上看这跟脐带水肿很厉害,这就是脐带粘的主要原因,但是对分离后培养没有太大的影响,估计原代细胞会碎片多一些。多换几次也就行了。# r: m/ |. u: Q- J( B' k% z9 H: P
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板凳
发表于 2012-8-15 09:31 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
的确你的实验环境有很大的污染可能性。注意无菌操作啊。

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报纸
发表于 2012-8-15 09:37 |只看该作者
脐带水肿,细胞爬出受阻小,反而容易成功。
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地板
发表于 2012-8-15 13:06 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-8-15 09:22
1 o& t. F7 s: M! W$ J( R) U" a回复 huajie881026 的帖子7 N  _  z$ u  H( o- g. H. F
6 O$ n; W5 T0 f* r
这种情况正常,不会对分离产生影响。可以过一下75%乙醇消毒30s,会有很大改善 ...

  w/ b; f# x: O& [, g1 u' V/ b/ p谢谢提醒,我们的原代超净台的确比较脏,以后会更加注意!

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发表于 2012-8-16 14:15 |只看该作者
回复 huajie881026 的帖子) h& z* [& X, S' ~3 a, x' |5 ]

0 b$ g  f7 q% y! u; z呵呵,你要是用过酶消化的方法就知道了,脐带里面很多多糖成分,所以会是这个样子!
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发表于 2012-8-17 00:28 |只看该作者
回复 透明之蓝 的帖子
( V9 M8 ~; x0 ]. W; [/ J
) F8 R# `) e. |* N7 r2 Y消化法我的确做过,也的确很粘。不过不用消化法这么粘的还是第一次见
% z) |% A0 m( W酶消化法我做了一次没成功,所以没再尝试,你用酶消化法细胞量多吗?
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发表于 2012-8-17 23:00 |只看该作者
脐带粘  很正常的  对分离没什么影响    如果脐带不肿   可能还会比较好      但是你的操作环境很有问题
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发表于 2012-8-18 15:53 |只看该作者
回复 huajie881026 的帖子/ k' [' ~: ^5 P2 y, d( B
" J! z+ x- Y  A' h, A
呵呵,酶消化法,还得加上透明质酸酶,这样就不粘稠了~~( {4 s. L# q$ |8 x) l
你要是着急获取细胞,就酶消化,速度快;要是不着急,就可以用组织块贴壁的方法,一块组织块可以重复利用,收获的细胞更多!
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