干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 41538|回复: 18
go

[请教] 求助脂质体转染   [复制链接]

Rank: 1

积分
10 
威望
10  
包包
196  
楼主
发表于 2012-8-18 09:35 |只看该作者 |正序浏览 |打印
请问如果我用脂质体转染小鼠的间充质干细胞可行吗?哪位大师给我讲讲具体过程啊?我需要买些什么东西?万分感谢,大家来帮帮忙
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
348 
威望
348  
包包
1068  

优秀会员

19
发表于 2012-11-30 08:44 |只看该作者
大部分细胞都可以用来转染的,只不过是转染效率的问题,要想知道具体步骤的话,买个脂质体,上面的说明书有具体的操作步骤,但是要想提高转染效率,可能还需要摸索一段时间具体的条件,比如转染试剂的量,脂质体的量,转染时间等等
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
348 
威望
348  
包包
1068  

优秀会员

18
发表于 2012-11-27 09:39 |只看该作者
脂质体转染,主要就是需要脂质体和MEM液,这两种准备好了,就是按照所购买脂质体的说明书进行转染了,如果是miRNA转染的话还需要无RNA酶的枪头盒EP管,防止细胞细胞内RNA酶的降解。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 8 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 8  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
348 
威望
348  
包包
1068  

优秀会员

17
发表于 2012-11-5 09:08 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
脂质体转染主要就是买脂质体啊,脂质体2000,要准备好冰盒,MEM,培养基,要转染的试剂,无RNA酶的EP管,计时器等,准备好了这些,你就可以按照说明书进行转染了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
19 
威望
19  
包包
64  
16
发表于 2012-11-1 13:13 |只看该作者
回复 guokeliuhen 的帖子
3 i5 ^; k/ ?, J4 G2 o8 b( R6 G- S- _% N7 F7 a/ k5 d- u+ D+ p
同意,干细胞这玩意,有点难伺候,和肿瘤一样,油盐不进。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
10 
威望
10  
包包
196  
15
发表于 2012-10-8 08:44 |只看该作者
回复 willing 的帖子
; I( ~. Y7 j: {* `& e* q6 a' p& k1 }2 \; W0 a( k: D4 G
我的也不带荧光,条件摸索就更麻烦了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
20 
威望
20  
包包
174  
14
发表于 2012-9-30 10:48 |只看该作者
显然可以的,脂质体适用范围还是挺广的。5 T# Y. @5 x8 m4 |

2 T* s, K9 l; q. X% T; ?- @目前我就用脂质体转染,效率还摸索中,因为我的质粒不带银光,所以只能做WB检测了。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
38 
威望
38  
包包
133  
13
发表于 2012-9-29 10:36 |只看该作者
回复 Libbychou 的帖子
. v* u# Q$ h* X6 v+ C
2 b' P# O0 d; v. `加油吧,以后的路还很长呢,每个用到的新技术都会有段适应期的,需要不断的摸索条件,不过前途还是光明的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
10 
威望
10  
包包
196  
12
发表于 2012-9-7 13:49 |只看该作者
回复 guokeliuhen 的帖子5 `) R* d% Z" e7 Y: v# V3 j
3 ?: t4 g: }, `  Y4 ]5 }
用电转染我们这没这个条件吧,科研这条路太难走,我还没开始走问题就多多

Rank: 1

积分
38 
威望
38  
包包
133  
11
发表于 2012-9-6 21:40 |只看该作者
目前很多实验室做干细胞的转染都会选择电转染方法,如果转染干细胞是你课题必要手段,建议你跟老板说改用电转的方法,要不然可能会因为一个很小的问题让你在科研道路上走很长的弯路,尤其是建平台时期那真可以说是消耗青春呀。周围很多活生生的例子呀。科研道路上一个小小兵的一点感慨。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-5-14 18:39

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.