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本帖最后由 myboluo 于 2012-8-20 22:40 编辑 / N$ Z |! L w9 v* V
" \4 P% o, V/ a3 X7 n回复 一转身的距离 的帖子
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如果是传代消化时不贴壁应该是你消化时间过久导致细胞损伤了,可要是复苏时不贴壁可能原因就多了,降温过快、复苏操作不正确都可能导致细胞大量死亡(看看不贴壁的细胞是否边界清晰、透明,否则是死细胞)。RAW264.7本身贴壁非常牢,可我同学养了一段时间后,也比较好消化了。她消化时先用胰酶消化不超过5min,含血清培养基终止消化,之后用刮刀刮。后来嫌刮刀会污染,就用手拍打培养瓶代替(拍有细胞的那一面),或者尽量用吸管吹,吹不下来的就舍弃不要。消化下来后还不贴壁,请耐心等待3~5天(实际上就是放孵箱不管了,千万不要时不时的看),小鼠巨噬细胞贴壁都很慢,原代培养时需要7天左右。 |
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