神经干细胞贴壁形成sphere

zxq050729

大家好：
6 U5 n+ v! f* a. _   我是养神经干细胞的新手，最近我养的一批神经干细胞，解冻的时候生长良好，传代后都形成sphere，我也不知道自己哪些地方出问题了，请各位高手指点指点，谢谢

zxq050729

应该不是sphere，而是聚集在一起了

细胞海洋

说明你的试验方法 最好附带图片

zxq050729

我传代的时候一般步骤如下。% b& l% S/ E6 D3 R! ], X$ c
1.用laminin包被板至少两个小时，放在37度培养箱中
# \+ d  }8 T; o6 d- g2.取出培养箱中的细胞，将原先的培养液吸去，PBS洗一遍死细包。24孔板中加入200微升胰酶，大约看到细胞收缩明显的时候，立马加入喊血清的培养基终止。
! ~5 Y* ?4 j8 l" P  T2 V0 c3.轻轻用200微升的枪吹打，然后将细胞吸出放到EP管中1300转离心3分钟，这时候将l铺板aminnin用PBS洗掉& ?' F+ C4 X; o$ @9 R
4 ，去掉上清，加入新鲜培养基，放入铺板的24孔板中培养。
: v' }+ z; B3 i% d+ |) [) [  Y0 k另外，我用的试剂都是从国外公司购买，应该不是这方面的问题

zxq050729

zxq050729

这就是

dianying

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" ]) x6 H1 n) z
不是sphere。

redmaple

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& T; a5 X/ v2 P, e$ z0 f5 B# _( I4 k; d
这不是sphere

bibottll

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3 \1 D4 F# T+ Q2 g: s! W7 i. [
我也是新手，但是你这个形状很奇怪啊，你的实验方法和我的是一样的，但是我没出现过类似情况呀，坐等高手解答。。。

romanyuo

细胞贴壁未太牢固，胰酶浓度太高，消化过度。建议细胞铺均匀多养一些时间，稀释胰酶消化，提供更适宜的微环境给NSC。