神经干细胞贴壁形成sphere

zxq050729

大家好：, L. l8 }; n/ w( l# G2 g3 @! @$ K
   我是养神经干细胞的新手，最近我养的一批神经干细胞，解冻的时候生长良好，传代后都形成sphere，我也不知道自己哪些地方出问题了，请各位高手指点指点，谢谢

zxq050729

应该不是sphere，而是聚集在一起了

细胞海洋

说明你的试验方法 最好附带图片

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我传代的时候一般步骤如下。7 ~, R+ j! ^6 |4 h9 k6 D2 D
1.用laminin包被板至少两个小时，放在37度培养箱中$ A, ?7 C% G' m+ i
2.取出培养箱中的细胞，将原先的培养液吸去，PBS洗一遍死细包。24孔板中加入200微升胰酶，大约看到细胞收缩明显的时候，立马加入喊血清的培养基终止。8 `  ^1 [, R" ]2 b
3.轻轻用200微升的枪吹打，然后将细胞吸出放到EP管中1300转离心3分钟，这时候将l铺板aminnin用PBS洗掉
# S# O$ P& A3 y  p# B7 T4 ，去掉上清，加入新鲜培养基，放入铺板的24孔板中培养。
$ I' v# n: a- L+ ]另外，我用的试剂都是从国外公司购买，应该不是这方面的问题

zxq050729

zxq050729

这就是

dianying

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' q, W+ d7 {% {不是sphere。

redmaple

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/ R7 `& a- [4 R+ v  \( c这不是sphere

bibottll

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我也是新手，但是你这个形状很奇怪啊，你的实验方法和我的是一样的，但是我没出现过类似情况呀，坐等高手解答。。。

romanyuo

细胞贴壁未太牢固，胰酶浓度太高，消化过度。建议细胞铺均匀多养一些时间，稀释胰酶消化，提供更适宜的微环境给NSC。