神经干细胞贴壁形成sphere

zxq050729

大家好：) o7 A' ?1 A0 k7 m. E
   我是养神经干细胞的新手，最近我养的一批神经干细胞，解冻的时候生长良好，传代后都形成sphere，我也不知道自己哪些地方出问题了，请各位高手指点指点，谢谢

zxq050729

应该不是sphere，而是聚集在一起了

细胞海洋

说明你的试验方法 最好附带图片

zxq050729

我传代的时候一般步骤如下。
7 g  F0 a5 d8 M$ C" d9 k0 c1.用laminin包被板至少两个小时，放在37度培养箱中
' O* I, H7 E* h1 @2.取出培养箱中的细胞，将原先的培养液吸去，PBS洗一遍死细包。24孔板中加入200微升胰酶，大约看到细胞收缩明显的时候，立马加入喊血清的培养基终止。( A1 A" O; i) ?  ^% z1 N! G
3.轻轻用200微升的枪吹打，然后将细胞吸出放到EP管中1300转离心3分钟，这时候将l铺板aminnin用PBS洗掉5 R8 o+ [' @( g+ K# i
4 ，去掉上清，加入新鲜培养基，放入铺板的24孔板中培养。! {9 t2 _; b2 c8 Q% B" \
另外，我用的试剂都是从国外公司购买，应该不是这方面的问题

zxq050729

zxq050729

这就是

dianying

回复 zxq050729 的帖子
2 |8 d' g8 P5 e% M+ n, w
- f* q, [& p; R% f& W7 P: @; s不是sphere。

redmaple

回复 zxq050729 的帖子
3 }: h! X9 y0 R9 U* M/ k
& M8 X, b6 m- v" Z这不是sphere

bibottll

回复 zxq050729 的帖子1 X- i& F& _/ T- Y( {
5 q# f% E+ [5 f/ Y; x
我也是新手，但是你这个形状很奇怪啊，你的实验方法和我的是一样的，但是我没出现过类似情况呀，坐等高手解答。。。

romanyuo

细胞贴壁未太牢固，胰酶浓度太高，消化过度。建议细胞铺均匀多养一些时间，稀释胰酶消化，提供更适宜的微环境给NSC。