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请教消化人胚胎干细胞时用什么酶比较好 [复制链接]

又见干细胞

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包包
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楼主
发表于 2012-9-6 09:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题，谢谢！
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fish_zbw1985

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包包
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沙发
发表于 2012-9-6 10:25 |只看该作者
MEF上培养用四型胶原酶，Feeder-Free上培养用dispase，消成单细胞用胰蛋白酶
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bj123456

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藤椅
发表于 2012-9-6 10:43 |只看该作者
回复 又见干细胞 的帖子% y: ~- m- Z! O: v

: J! ?5 E: y. D3 f  p$ M( |& ?一般情况用COLLIV或dispase
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flydayzhu

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板凳
发表于 2012-9-6 11:23 |只看该作者
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colony的话我现在用的是dispase，单细胞的话是accutase
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ljs

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报纸
发表于 2012-9-6 11:27 |只看该作者
胰酶消化力很强，有条件的话换COLLIV或dispase，没有那个条件就把胰酶的浓度稀释，低温消化，可以保护干细胞。
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辛西雅

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地板
发表于 2012-9-6 16:33 |只看该作者
0.25%的胰酶，我们实验室培养的胚胎干细胞都是用的这个
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chentian820

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7楼
发表于 2012-9-7 11:14 |只看该作者
这主要看你的应用了。前面的战友已经回答的比较详细了。但提醒你注意一点，如果你的细胞养在matrigel上，而且你要用它做后续分化，建议你还是用无酶消化体系，比如versene。
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又见干细胞

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8楼
发表于 2012-9-10 09:38 |只看该作者
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, G. ~) O+ `; R0 ]3 \4 q
+ i# N3 X, B2 f2 k2 M. J7 o7 K谢谢，我用的是四型胶原酶，为什么我觉得消化下来的克隆变松散了，不象机械法消化下来那么紧密，是不是我消化的时间过长了，我要消化近一个小时克隆才能消化下来。
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又见干细胞

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发表于 2012-9-10 09:39 |只看该作者
回复 bj123456 的帖子4 O# F. w* n; Y/ c1 t( G

1 R6 X) C9 S, G谢谢
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又见干细胞

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10楼
发表于 2012-9-10 09:39 |只看该作者
回复 flydayzhu 的帖子0 P( h) k, n  e

$ W$ b8 ^/ R8 O9 W/ M  E/ a6 s谢谢
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