求助：间充质干细胞培养——细胞成团

caiyu07248

我养的间充质干细胞是脐带来源的，原代培养的前两三天细胞贴壁很正常，形态也挺好的，但是到第五时就不对劲了，细胞都聚集在一块，形成了一个个的细胞团，请大虾们给点意见！！* e3 v$ D& Y; p% J5 Z' M/ y
从图片中可以看出，其实细胞生长得空间还有很多，培养瓶还有很多空白的地方，但是它为什么不往边上长，偏偏聚集成团呢？问题棘手，请指教！  t4 I7 f$ r3 g7 i

bsx1111

我也出现过这种情况，我怀疑是血清的问题，可能血清导致干细胞分化造成的，你用的什么血清啊

luckywen

接种时需要吹打均匀，也许是培养基ph或培养箱气体浓度有问题。

细胞-77

可能是干细胞的特性吧，

romanyuo

有可能是培养瓶或培养箱水平问题，铺匀后放到培养箱后要水平晃匀。

ditiger

细胞成团因为细胞在消化时没有被吹成单细胞悬液，在胰酶中加点EDTA试试

细胞海洋

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esc123esc

你用血清培养还是用血清替代物呢，无血清的培养条件下很容易聚团生长，无血清条件下没有血清那么多刺激生长的因子，细胞之间需要更紧密的连接才能维持干性，很容易聚团，如果是10%血清培养一般不容易出现这种情况

esc123esc

具体解决办法就是，用优级胎牛血清，培养皿用胶原或者其他胶质包被以促进贴壁，但是我觉得没有这个必要，只要能维持好了间充质细胞的干，贴壁或者是成球悬浮都不重要，只是细胞的一种生活方式，看哪一种条件下你的细胞生长状态好而且不分化就用那一个条件，没有必要千篇一律

caiyu07248

回复 esc123esc 的帖子6 k- r. c, W) P# t7 o

+ q( q/ A0 ~6 P! O6 h) [4 b# f我用的是无血清培养，问题是细胞成团了之后，不容易消化完全，再接种的话，会有一个个小的细胞团，然后培养又成团了。