大提过的质粒浓度只有260ng/ul，如何浓缩一下。具体步骤怎么样的，谢谢啦

willing

我想重新过柱，从哪一步开始呢？
( d8 Y/ r. l3 P6 J" S5 u& f或者还有其他方法吗？

nculsa747

用多少水溶的？如果是100ul，建议重新摇菌。是的话，拿这个260ng/ul的质粒是做不出实验的。

willing

回复 nculsa747 的帖子4 {* b; K0 Z. a2 u; ?1 N

% |9 b5 L# v& I8 A1 t/ p/ }8 I有2ml的质粒溶液。想提到1ug/ul以上。我看网上说用NaAC乙醇沉淀，这样的话，大概会损失多少？最后定容多少，会达到我的要求。

willing

已经解决" V1 y/ ?# n/ p$ B8 ~4 k+ f6 d* q3 {7 S/ v
- `1 U. a' B6 L/ A
900ul的质粒，260ng/ul。加NaAc90ul，再加2ml无水乙醇，冰置20分钟。离心12000转，5min。然后75%乙醇洗盐。离心沉淀。
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/ I' Q. s. [8 e5 I+ l, v加入100ul去离子水，最后测浓度达到了1850ng/ul。

shy8610

楼主用的是乙醇沉淀法，还记得大提试剂盒都是告诉我们先异丙醇沉淀，后乙醇沉淀，还有楼主的”大提“，可能不是真正的大提，我们大提2500ml菌液，质粒5-15mg的产量，不管是转染还是免疫，都是终浓度调成1mg/ml(1ug/ul)