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本帖最后由 细胞海洋 于 2014-9-17 09:11 编辑 ! P; v# v! E7 g; j% M1 @ ]. t
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: m6 Q B$ n; T0 W关键步骤是:
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2 w+ A8 y' i% x) t% ^' G1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直，绷紧，这是成功的第一步。
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小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。2 t* V0 a+ q. `. Z, K. d
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或者用这个方法：1 小鼠要固定好，自制一个笼子，前面通气，中间最好有一个挡板，让小鼠不能后退，筒子后面开一个口，尾巴从这里出来，这样固定牢靠；2、注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟，有利于注射；3、先远后尽，不要一开始就从尾根部，那样失败了不好办；4、进血管后注意保持稳定，针尖很容易刺穿血管的。至于能否穿进，个人手感如何，全靠自己啦。多练习，一定很快掌握的，不难，绝对不难！我练习10余只小鼠就比较熟练了
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2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张;或者用热水或者热毛巾焐热，使静脉扩张；选用适当的针头，越细越好；在尾部较靠近上段的地方注射，这里血管比较大。用酒精或热水擦拭，擦拭的时候，可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白，紧靠白色的尾骨两侧清晰可见两根红色静脉。: C- @8 Y' [" ?: S/ l. E6 J
3.用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定,; 手法：握住1ml注射器前面0.1ml处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处 按此手形进针；看针尖前面那个斜面有3/4（关键），如果血管充盈则进1/2，进入，停，上挑针头，进针；左右轻摆动，如可动，可注射。 9 N$ W- H' u! f* z
原则是：把你第一次打进的手形，完全固定下来，每次都重复。& P$ A( k6 q* S: a& r
4.注射:注射时左手扯尾，使尾巴紧贴桌面，尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位，一般选择距尾尖1/4或1/3处进针，此处皮肤较薄，血管清晰，进针容易。进针时针头与桌面平行，针尖稍稍朝下，从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针，一旦进入，须将针头稍稍上挑进入，针头沿血管进入，肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进，可明显地感觉到针行通畅，毫无阻力。若针头不在血管中，手感针行有阻力，有一种堵的感觉。进针时不要太深，针头入皮肤后马上把针头略往上，平行进针，针扎入时有落空感，推液时无阻力则说明成功了！如针头处出现皮丘则说明在皮下，推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处，甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来，不要马上在最高处打，因为你们要打这么多天。要为以后作准备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之，最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天，真的很难打的。
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2。注射：针进入后，切记手不可发抖，因为血管壁非常薄，容易扎穿。推药时，要缓推。若进针成功，推药顺畅，无阻力；若推药时感觉有阻力，说明针头不在血管中，须及时拔出，重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难，主要是一种感觉。若用上十只鼠练手，你必会找到感觉。心要静，手要稳，要有耐心。我研一的时候尾静脉注射让我头疼万分，越急越打不进去。后来静下心来，边注射边找感觉，很快就熟练了。
6 N2 T& D. e6 w+ @: H祝你找到感觉9 P. k9 C0 r+ _5 h
2 r, [) A$ Z) V' c5.通过看有无回血来测试针是否在静脉内;
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6.注射.0 p! D: d+ K: U$ R! L' |
做到以上步骤,保证注射成功!
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$ F0 l V; W W& k1 N" V注：（1）如果做细胞移植时，应该尽量把细胞打散，不然很容易引起栓塞！
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（2）练习：建议你先用蓝墨水练手，因为新手往往看不出打入的是皮下还是静脉
+ Y" M- R$ e4 v' k: b$ m4 N# j其实真的只能熟能生巧一般推荐在尾下1/3处进针，但是我觉得1/2处准确度较好，个人经验针头可以插深入些，防止意外摆动戳破静脉而注入皮下，很多时候你觉得进了血管打的却是皮下，就是因为这个原因。
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或者用：经常尾经脉注射胎盘兰，比较容易，静脉在侧面比较粗的那个，可以做个容器，我们是用一个50ml的离心管前面弄个开口，后面的螺盖弄个洞，把老鼠装进去，比较容易，把都对准管小鼠自动进去，把尾巴从盖子的洞穿出来，操作极为方便。刮毛，用热水烫一下，血管涨起来就可以，具体的感觉还要自己实践一下掌握，不过还容易，有3－4只就可以掌握。
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" t8 z/ n5 O3 j3 Y% Q（3）规律：动物越小越好操作，小鼠比大鼠容易，幼年大鼠比成年大鼠容易；对于小鼠最好还是尾静脉注射，这样损伤最小；成年大鼠实在不行可以选股静脉注射，相对要容易一些；最重要的一点，必须多练，进针时的那种感觉必须自己好好体会，熟能生巧，这是常识。 |
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发表于 2012-9-10 17:05
发表于 2012-9-26 17:03
