有谁从睾丸组织中分离过初级精母细胞吗？

jhu132llh

回复 随心 的帖子. i3 S& i- \* V# b- K* f) S
' ]' ]1 O' k5 ]$ S9 R
好的) Y$ w4 A# _$ v, Z
给你发几篇经典的生殖细胞分离的方法和一篇培养液使用讨论方法吧  K; Y6 v6 ~4 g: G4 z+ S
他们主要是分选培养精原干细胞的
0 g2 A, O; @; [% P方法步骤都很详细，照着做肯定没问题的
  C; H0 g" ?: U) l% }- f你要是不分选干细胞的话就做到laminin包被的时候收集未贴壁细胞就是非干细胞类型的生殖细胞- s3 t- Y. L/ ~; W  b3 R# N
; B* l" r, P9 S8 |6 q
7 @4 ]8 g$ o6 i; [5 [( T4 u8 u

490096812

1，取到新鲜的睾丸组织（注意保存）
3 |- ]+ |- J' ]7 S0 Q9 ]) a2，消化分化得到细胞悬液
5 v! C( ], }5 p3.可以利用梯度离心或者是差异贴壁进行纯化细胞（细胞不纯
2 y0 c& F$ T! ?4 b( W) V4.如果需要的数量少可以进行单细胞分离

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1，取到新鲜的睾丸组织（注意保存）
4 \% \+ W' I- P2，消化分化得到细胞悬液
2 ^& v- ~0 ^# P( J9 r3 T' G# W3.可以利用梯度离心或者是差异贴壁进行纯化细胞（细胞不纯
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1，取到新鲜的睾丸组织（注意保存）
6 }, @* L1 ^) Q* ]  B) v2，消化分化得到细胞悬液
1 O9 S0 |9 I/ X# t, F4 }3.可以利用梯度离心或者是差异贴壁进行纯化细胞（细胞不纯; X. Z3 ?; `& M) ~
4.如果需要的数量少可以进行单细胞分离

随心

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- j4 R- v* A: j& L- S# v% X+ \/ N* A
谢谢你哦，感激。你有这方面的文章吗？分离别的生殖细胞的也可以，有具体做法的？谢谢

jhu132llh

问题比较多
# A' A/ K3 j8 r; ?! j0 X6 e一个个的回答吧
/ ?8 |' v0 |$ a1.睾丸必须是新鲜的吗？可以冷冻吗？
3 @' s- w& P( F, v& _: d  j睾丸最好是新鲜的，但也可以冷冻保存的，就是要选个好的冷冻体系，一般复苏出来细胞活性还有90%左右或者以上就可以了' J6 V/ }) O. R: l
加拿大有个组有个博士专门做这个，发了文章了还有他的博士论文，以前看过具体题目我忘了，可以搜索一下，效果还马马虎虎6 ?3 @. C( x! T& E) m0 L2 L5 b
2.可以的话在多少度冷冻？？？
, Q3 }$ T) K8 y: O& y% h短期可以再4度保存，大约1周-1月，再长期保存的话可能就需要-80度或者液氮保存了% E+ j! F$ S1 P: s
3.想从睾丸组织中分离出粗线期精母细胞，有谁知道具体步骤吗？* Y" j3 [# Z- v& n8 P& f" x
这个好像没有看够这方面的文章，要是分所有的生殖细胞还有很多的文献