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求助:小鼠超排效果不好,什么原因?急! [复制链接]

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楼主
发表于 2012-9-13 11:53 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 longxiang 于 2012-9-13 11:56 编辑 5 D7 X4 S4 Q) ^/ B4 t

: a8 C. q: ]0 O+ a/ s8 L3 u/ b! z' _* m3 H最近一个月的小鼠超排效果都不好,想请教下可能的原因。; E4 z  C0 I1 t% W# U% t/ E0 o( Y
目前鼠房的控制入下:
: p- E/ y  M* T; Y* o光照7:00——21:00,选择体重在26——28g的处于发情前期的ICR小鼠,13:00左右注射PMSG 10IU,46~48h后注射HCG 10IU(用的是宁波激素厂的),打完后就合笼,然后第二天上午9:30冲卵(划破壶腹部),但经常只能冲出几个来,偶尔才有成团的。而且有时候会发现卵巢外的那层囊膜鼓鼓的,似乎里面充满了卵泡液。  ~+ _# T& {, L4 m9 N% m+ F
有没有人遇到过类似问题,这到底是什么原因造成超排效果这么差呢?
5 n. z1 d: ^" r8 {% ?2 ~  L& ^  e& ?6 E- f$ W$ V
最后还想吐槽,刚开始做的时候,还没什么经验,那时候反而比现在排的卵多!
! q" {) A: t4 ?9 R
, S8 {9 |, q, t" O- W
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金话筒 优秀版主

沙发
发表于 2012-9-13 12:30 |只看该作者
我也遇到类似问题,我都研三了 ,小鼠超排是最简单的实验,从来没出过问题,今年从9月份开始,突然超排的小鼠连膨大部(壶腹部)都没有,才是郁闷。
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藤椅
发表于 2012-9-13 13:38 |只看该作者
超排不好,主要是因为季节的原因,不知道你们那边鼠房温湿度控制怎么样?
( |. t% b) K1 x建议你们控制一下温湿度,并且改一下超排的时间,最好是下午五点左右吧。
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板凳
发表于 2012-9-13 14:13 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
超排应该是在下午4点半到5点半之间进行吧。
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报纸
发表于 2012-9-13 14:50 |只看该作者
回复 exin11 的帖子
- D+ c4 P' w& d5 U, L, @" b9 l) F- ^& t) }. G. [# @; I. d
鼠房的湿度在60%,温度22~25℃,超排时间对排卵影响大吗?
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地板
发表于 2012-9-13 14:51 |只看该作者
回复 yangpan521 的帖子1 O( R; l" v7 }
. L" v2 z9 h* g  [
同是天涯沦落人啊!
/ v1 t* j* h* ?3 G8 S+ f现在有头绪吗?

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发表于 2012-9-13 18:00 |只看该作者
超排时间影响挺大,时间长了,卵就老了。另外,温度稍微有点高。
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发表于 2012-9-13 18:00 |只看该作者
超排时间影响挺大,时间长了,卵就老了。另外,温度稍微有点高。

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发表于 2012-9-14 09:37 |只看该作者
我们实验室特别有经验的老老师看了说:你激素打多了!!
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发表于 2012-9-14 12:31 |只看该作者
本帖最后由 longxiang 于 2012-9-14 12:32 编辑 . ?% s: p: I, J0 |/ k7 l

4 f2 T0 Q. s$ B) Y( j回复 182043883 的帖子* b+ U2 @& ~! y5 ~! N! V4 [
: H% u0 q6 G, N8 R
今天做了非超排的对照组,发现非超排的排卵13~15个/只,超排的16~18个/只,考虑到个体差异,完全没起到超排的作用嘛,观察了超排的卵巢,发现上面还有些比较大的突起的卵泡,怀疑是不是没排出来,正在考虑激素量该往上调还是下调呢。
, N& W' K, O) t5 ]另外,考虑到排卵的非同步性,所以把取卵时间往后推迟了1h,总算比前几天只有几个的情况好了点,也不知道是不是例外。不过发现卵都在壶腹部近子宫端,现在纠结这个取卵时间到底是早点好呢,还是晚点好,晚点的话担心受精卵会离开壶腹部,进入下游,你们的时间是什么时候啊?8 j6 a! B, i+ \& J3 g/ |
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