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求助:小鼠超排效果不好,什么原因?急! [复制链接]

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楼主
发表于 2012-9-13 11:53 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 longxiang 于 2012-9-13 11:56 编辑 1 e9 ^$ W6 E/ [2 R% e
9 h2 O7 [! J6 @1 |7 A6 Z
最近一个月的小鼠超排效果都不好,想请教下可能的原因。
+ [) W7 J8 W5 d, O( O0 N目前鼠房的控制入下:
: T; B) R5 n# R* m4 M光照7:00——21:00,选择体重在26——28g的处于发情前期的ICR小鼠,13:00左右注射PMSG 10IU,46~48h后注射HCG 10IU(用的是宁波激素厂的),打完后就合笼,然后第二天上午9:30冲卵(划破壶腹部),但经常只能冲出几个来,偶尔才有成团的。而且有时候会发现卵巢外的那层囊膜鼓鼓的,似乎里面充满了卵泡液。
/ t) i# c6 W6 E  h- E7 Q4 _  W有没有人遇到过类似问题,这到底是什么原因造成超排效果这么差呢?
' Q" ]% Y+ K8 q) U0 _) ?7 P1 ~: p9 `
最后还想吐槽,刚开始做的时候,还没什么经验,那时候反而比现在排的卵多!0 ~, [0 q1 v# B( G8 e" X

% B9 L: `/ I1 t9 K
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金话筒 优秀版主

沙发
发表于 2012-9-13 12:30 |只看该作者
我也遇到类似问题,我都研三了 ,小鼠超排是最简单的实验,从来没出过问题,今年从9月份开始,突然超排的小鼠连膨大部(壶腹部)都没有,才是郁闷。
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藤椅
发表于 2012-9-13 13:38 |只看该作者
超排不好,主要是因为季节的原因,不知道你们那边鼠房温湿度控制怎么样?
1 s. o4 C. C3 t& v建议你们控制一下温湿度,并且改一下超排的时间,最好是下午五点左右吧。
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板凳
发表于 2012-9-13 14:13 |只看该作者
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超排应该是在下午4点半到5点半之间进行吧。
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报纸
发表于 2012-9-13 14:50 |只看该作者
回复 exin11 的帖子
% N1 d! @% ^: a7 \
* @, L2 y/ W/ ^0 r鼠房的湿度在60%,温度22~25℃,超排时间对排卵影响大吗?
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地板
发表于 2012-9-13 14:51 |只看该作者
回复 yangpan521 的帖子: C* N* \$ Z9 D, n1 Q# K

2 C1 m% `) a# Y# z同是天涯沦落人啊!
2 V5 @: X( l5 z& P8 Y* q% T$ R# v现在有头绪吗?

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发表于 2012-9-13 18:00 |只看该作者
超排时间影响挺大,时间长了,卵就老了。另外,温度稍微有点高。
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发表于 2012-9-13 18:00 |只看该作者
超排时间影响挺大,时间长了,卵就老了。另外,温度稍微有点高。

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发表于 2012-9-14 09:37 |只看该作者
我们实验室特别有经验的老老师看了说:你激素打多了!!
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发表于 2012-9-14 12:31 |只看该作者
本帖最后由 longxiang 于 2012-9-14 12:32 编辑 # O& |1 M( B! Q5 b, c$ D3 ^
! l4 B5 n. u1 e7 Q/ J
回复 182043883 的帖子
) S2 g' n! e/ r' I+ X% e9 U' @) l. Q
今天做了非超排的对照组,发现非超排的排卵13~15个/只,超排的16~18个/只,考虑到个体差异,完全没起到超排的作用嘛,观察了超排的卵巢,发现上面还有些比较大的突起的卵泡,怀疑是不是没排出来,正在考虑激素量该往上调还是下调呢。3 ~, n, M8 q$ N& K6 h. Z6 M2 A
另外,考虑到排卵的非同步性,所以把取卵时间往后推迟了1h,总算比前几天只有几个的情况好了点,也不知道是不是例外。不过发现卵都在壶腹部近子宫端,现在纠结这个取卵时间到底是早点好呢,还是晚点好,晚点的话担心受精卵会离开壶腹部,进入下游,你们的时间是什么时候啊?
5 G7 e, w9 J( J: T2 t8 p
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