你养的间充质干细胞能传几代？

huajie881026

如题，虽然努力控制消化时间，但是细胞还是渐渐老化！所用的培养基均是Gibco的DMEM-LG+10%澳洲FBS+1%双抗。9 c  L4 P0 y1 \; n& J
SD-MSCs做了几次，大约在P7左右增殖能力明显减弱，并且细胞变扁变宽。0 g& y; R1 Z  I, V& {% }( F
我养的hBM-MSCs因为都是骨科来源的，病人年龄都比较大，MSCs基本传至P3、P4就老化了，并且增殖速度明显减慢。
+ z  M" b8 d7 U6 M" mUC-MSCs和CB-MSCs也就能传至P5。
" ]1 F+ i% \/ ?  N0 L  Z4 M& ~: c虽然看很多文献报道说可以传很多代细胞形态没有明显改变，但是也有文献中给的图片在较早代数就会老化。# H5 A6 C$ T1 f3 v3 j
很想知道各位大侠MSCs所能传到的代数，以及如何减缓细胞的衰老。% U  R( [6 m' c& u' W7 c
欢迎交流！

huajie881026

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2 Y0 E  k4 L% P. m
" r4 Z( m5 t4 w请教您是如何消化细胞的呢？有什么更重要的细节可以使细胞少受伤害吗？

漂泊的风

基本没问题的。我们传到16代，细胞形态依然很好，估计还是操作的过程中出了问题。

星火燎原

回复 huajie881026 的帖子' T- k# u  Z# R" x! I0 c4 O
5 }$ Q0 R5 X1 A2 L3 ?- ~) J" A0 }- u
加双抗在一定程度上会促使细胞分化

huajie881026

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& v! Y7 d& `& C3 g  O; h8 S& V5 r- \8 \* T. N& c
为何不加双抗细胞状态会好一点，求指教！

星火燎原

回复 huajie881026 的帖子( L5 ~: D2 g7 _4 |3 `4 n/ v+ w* S
9 [9 i: k- C0 I3 F
不加双抗的话细胞状态会好一点，可以试着不要加

huajie881026

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1 P4 J# O& n# H3 V
! [& U# f. Z4 C  ~谢谢指点！

firstaider

MSC的传代次数和以下几个因素相关：3 M! ^5 I+ \& d
培养基情况、研究员操作水平、细胞来源情况
! ?! @& Q) a" y1 s* u不过一般不会传很多代，公司生产用于临床的干细胞也就在P4到P5，
+ G; E/ _- g0 Z! y! J1 a传代次数太多的话就算表型和形态都不变，其干性也会降低的。

biomater

一般是10代以内做实验都没问题的，听说骨髓间质干可以传到20代。。。。可我没做过这么久！！  t, U9 J/ v. N: d
自己做骨髓间质干实验的话，最的代数最大的传到7-8代，一般8代以上的都不拿来做了！
( d+ J, z7 e; T  S- R胚胎干细胞好像没有这个限制，我拿到手的细胞都是10代以上的了，只是帮别人养了一段时间。。。

yedanna

我养的是大鼠的骨髓间充质，最高培养到10代（没继续往下），连续培养，没冻存过。8代以后增值能力较弱，细胞变宽的数量增多。第10代的时候过流式，跟前面的2代没区别。分化能力没对比过。文献说大鼠的能传到60代以上，不过没试过。