如何鉴别养的细胞是不是干细胞？

lmh_yixue

       感谢论坛的朋友们一直对我的帮助。
# J$ E9 Q5 ]* h' @" T  l, S    想问一下， 如何鉴别自己养的细胞是不是干细胞？除了看一下干细胞阳性标记物是不是阳性外还有哪些方法？怎样多方面证明自己的细胞是干细胞？如何让区分干细胞和肿瘤细胞？谢谢大家！

ind6562

如果你的干细胞（原代）是由比较成熟的方法得到的，鉴定一些阳性标志和阴性标志就行了，比如间充质细胞的“四阴三阳”。
* [1 \  E) Q& x. Q+ D+ S0 W如果你用的是新创的方法，就在以上基础上诱导它的分化吧，能分化就是干细胞。

lmh_yixue

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" C9 r' N9 ~# t* z" b% \6 j* t6 ~. X( }6 d; m
谢谢！请问诱导分化的方法有哪些？

lmh_yixue

回复 ind6562 的帖子& ]' m5 W; K! h

8 v! v7 N0 M) @, L我把养得的类似干细胞的集落放到获得干细胞的原始细胞（间质细胞）中，细胞分化成原始细胞（间质细胞）。这是诱导分化了吗？

sdwzg119

干细胞也分好多类别的，一般肯定先简单相应的表型，然后诱导以后再鉴定是否分化成了相应的目的细胞。
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9 q* m9 D1 q  y5 A9 ?( o以间充质干细胞为例：鉴定了表型以后，在做三系诱导分化，就能证明细胞是间充质干细胞了。

ind6562

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6 g5 ?3 b/ ~& `$ [如果能证明这两种是完全不一样的细胞，那就是。9 ]5 C' \4 K: p8 j3 U5 y
诱导分化的方法很多，要看你希望你的细胞向哪个方向分化，比如加BMP（骨形态蛋白）就可促使一些干细胞向软骨或成骨分化。你把你的干细胞放回收集来源的细胞集落（这不能称原绐细胞，注意）中，或许可以诱导它向原来的细胞分化，是因为这些细胞分泌的一些因子导致的。

lmh_yixue

回复 ind6562 的帖子2 q$ ~  s' R' s6 r  {/ ]' I; y

0 a: n, g( K8 B2 z, v5 n真的受益匪浅！谢谢你细致的讲解！

lmh_yixue

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: e1 n7 u' M! A' c+ h$ |
( l' J+ O/ s, u' f4 o, e我也觉得原来的细胞分泌了一些诱导因子，很想检测出来，可以用什么方法呢？在换液的时候我已经把旧的培养液收集起来了。

ind6562

回复 lmh_yixue 的帖子! _  a0 \1 k5 e$ q& }8 n3 M
$ U! h2 s- L: {& Y( u
ELISA应该可以，检测前你要先针对性地预判会有哪些因子，因为要买抗体。

lmh_yixue

回复 ind6562 的帖子) s: @4 k+ W0 ~5 N
. S0 y. i9 ^+ c- m; F" b
预判挺难，前天把一个胚胎干细胞IM(内细胞团）也放入里面（间质细胞上），IM贴壁，两天后IM 找不到了，之前贴壁的地方转化成间质细胞。我怀疑是间质细胞分泌了某种因子诱导干细胞分化。