如何鉴别养的细胞是不是干细胞？

lmh_yixue

       感谢论坛的朋友们一直对我的帮助。7 K0 X7 J4 W1 M# u
    想问一下， 如何鉴别自己养的细胞是不是干细胞？除了看一下干细胞阳性标记物是不是阳性外还有哪些方法？怎样多方面证明自己的细胞是干细胞？如何让区分干细胞和肿瘤细胞？谢谢大家！

ind6562

如果你的干细胞（原代）是由比较成熟的方法得到的，鉴定一些阳性标志和阴性标志就行了，比如间充质细胞的“四阴三阳”。9 y' Y; r: h; P! a& N
如果你用的是新创的方法，就在以上基础上诱导它的分化吧，能分化就是干细胞。

lmh_yixue

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谢谢！请问诱导分化的方法有哪些？

lmh_yixue

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3 }9 F" W& B# }. Q! [% E, W( U我把养得的类似干细胞的集落放到获得干细胞的原始细胞（间质细胞）中，细胞分化成原始细胞（间质细胞）。这是诱导分化了吗？

sdwzg119

干细胞也分好多类别的，一般肯定先简单相应的表型，然后诱导以后再鉴定是否分化成了相应的目的细胞。9 q! q) y* f+ a7 m9 U7 i
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以间充质干细胞为例：鉴定了表型以后，在做三系诱导分化，就能证明细胞是间充质干细胞了。

ind6562

回复 lmh_yixue 的帖子, o: [- o, C" y$ L( |

' h+ ]  X" ]0 x3 z- l如果能证明这两种是完全不一样的细胞，那就是。
% }" n/ k+ F2 U( M诱导分化的方法很多，要看你希望你的细胞向哪个方向分化，比如加BMP（骨形态蛋白）就可促使一些干细胞向软骨或成骨分化。你把你的干细胞放回收集来源的细胞集落（这不能称原绐细胞，注意）中，或许可以诱导它向原来的细胞分化，是因为这些细胞分泌的一些因子导致的。

lmh_yixue

回复 ind6562 的帖子" k$ H; H% k4 `# a3 Y
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真的受益匪浅！谢谢你细致的讲解！

lmh_yixue

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我也觉得原来的细胞分泌了一些诱导因子，很想检测出来，可以用什么方法呢？在换液的时候我已经把旧的培养液收集起来了。

ind6562

回复 lmh_yixue 的帖子/ ]: o8 |, Y+ R, E% ]1 e- j

3 N  U  s& y6 E8 N" EELISA应该可以，检测前你要先针对性地预判会有哪些因子，因为要买抗体。

lmh_yixue

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预判挺难，前天把一个胚胎干细胞IM(内细胞团）也放入里面（间质细胞上），IM贴壁，两天后IM 找不到了，之前贴壁的地方转化成间质细胞。我怀疑是间质细胞分泌了某种因子诱导干细胞分化。