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[请教] 如何鉴别养的细胞是不是干细胞?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-18 09:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
       感谢论坛的朋友们一直对我的帮助。
0 n1 s0 W3 e9 g* x7 Y    想问一下, 如何鉴别自己养的细胞是不是干细胞?除了看一下干细胞阳性标记物是不是阳性外还有哪些方法?怎样多方面证明自己的细胞是干细胞?如何让区分干细胞和肿瘤细胞?谢谢大家!
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沙发
发表于 2012-9-18 09:45 |只看该作者
如果你的干细胞(原代)是由比较成熟的方法得到的,鉴定一些阳性标志和阴性标志就行了,比如间充质细胞的“四阴三阳”。
  i1 R' V+ n' ], G1 Y, _0 R+ `* B如果你用的是新创的方法,就在以上基础上诱导它的分化吧,能分化就是干细胞。
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藤椅
发表于 2012-9-18 09:55 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子, [9 J1 v/ l: }2 ?/ G4 h6 }1 U* q
4 d: t6 m9 ?7 Q
谢谢!请问诱导分化的方法有哪些?

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板凳
发表于 2012-9-18 09:58 |只看该作者
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回复 ind6562 的帖子, |2 h% ~" s, ?2 x" s% B& B6 [
+ P2 A2 [2 C) Y2 C$ w( G$ @
我把养得的类似干细胞的集落放到获得干细胞的原始细胞(间质细胞)中,细胞分化成原始细胞(间质细胞)。这是诱导分化了吗?
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2012-9-18 13:04 |只看该作者
干细胞也分好多类别的,一般肯定先简单相应的表型,然后诱导以后再鉴定是否分化成了相应的目的细胞。
: g; m  g$ X8 R: j6 f( T  o0 E5 C1 j# N8 a9 t4 a* q
以间充质干细胞为例:鉴定了表型以后,在做三系诱导分化,就能证明细胞是间充质干细胞了。
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地板
发表于 2012-9-18 13:18 |只看该作者
回复 lmh_yixue 的帖子1 L( E5 `- W8 C5 g: r: [- A+ T1 ^
! N) r* N- ~0 Z
如果能证明这两种是完全不一样的细胞,那就是。# q3 I5 u0 i" V, y
诱导分化的方法很多,要看你希望你的细胞向哪个方向分化,比如加BMP(骨形态蛋白)就可促使一些干细胞向软骨或成骨分化。你把你的干细胞放回收集来源的细胞集落(这不能称原绐细胞,注意)中,或许可以诱导它向原来的细胞分化,是因为这些细胞分泌的一些因子导致的。
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发表于 2012-9-19 13:29 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子! I/ ~" C' v( h
; v7 q/ T0 |/ M* u( d2 Y' R
真的受益匪浅!谢谢你细致的讲解!

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发表于 2012-9-19 13:31 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子
( o; w5 D) l+ _. f" H- M0 u8 u4 ~+ n  N
我也觉得原来的细胞分泌了一些诱导因子,很想检测出来,可以用什么方法呢?在换液的时候我已经把旧的培养液收集起来了。
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发表于 2012-9-19 13:56 |只看该作者
回复 lmh_yixue 的帖子
$ M# r, k3 g! e" j
7 a* f/ w: l% X0 f! y; {ELISA应该可以,检测前你要先针对性地预判会有哪些因子,因为要买抗体。
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发表于 2012-9-19 20:18 |只看该作者
回复 ind6562 的帖子9 [6 q5 m3 k/ I2 ?( C+ k& r, @

6 F+ r7 U8 p2 m, W+ }, J' Z预判挺难,前天把一个胚胎干细胞IM(内细胞团)也放入里面(间质细胞上),IM贴壁,两天后IM 找不到了,之前贴壁的地方转化成间质细胞。我怀疑是间质细胞分泌了某种因子诱导干细胞分化。
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