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求解:原代ADSC培养瓶出现铺路石样细胞 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-9-22 13:08 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
取12周龄雄大鼠腹股沟脂肪干细胞,第二天看有高亮度铺路石样杆状细胞,很整齐的排成两条呈直线状生长,之后几天这细胞仍然继续快速生长,直线延长。用的是H-DMEM和10%FBS和双抗,问了师姐说应该不是细菌污染,也不知道是什么,难道混入了上皮细胞?( T5 d! v/ r; q9 n2 O
另外还有一点请问,取来的细胞培养后一直就是圆圆的帖壁生长,数目倒是一天天增多,倒是没见过大家说的梭形脂肪干细胞,都已经10天了,取细胞时消化用的是0.2%的2型胶原酶(H-DMEM配制,0.22um过滤)37度100r/min震荡消化1.5小时,一次100um过滤,三次1000rpmx5min离心。" Q1 m% H- ?  k2 n7 }7 {8 o
怎么就只见圆圆的细胞不见梭形的干细胞呢.极度困惑中..." M: }/ a- V( @, _! L2 _5 i
新手上路,恳请各位指点,谢谢... ...
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-9-23 00:01 |只看该作者
铺路石细胞是内皮细胞吧~  P$ F) N1 @7 l2 m# i
H-DMEM不可以吧,用L-DMEM。
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藤椅
发表于 2012-9-24 15:27 |只看该作者
回复 ditiger 的帖子
. @" m2 j1 x. D8 @! B7 P' b2 v. m/ y5 x
以前也养过血管内皮细胞,如果是内皮细胞,应该伸展开来生长是吧?现在养的细胞光长数量(长得慢),形状却一直没变,已经养了12天了,换了3次培养基,还是近似于圆形样的。2 U- o4 l( v, d2 t0 M
虽然推荐是用低糖培养基,见园子里也有兄弟用高糖培养基养这细胞养成功的啊?
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板凳
发表于 2012-9-28 16:10 |只看该作者
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回复 ditiger 的帖子3 ]  D( F* a2 W) t$ A( _
8 x! C& V3 T* b0 L4 i
谢谢,已经养成功了...
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