哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

牙牙丫丫123

1．取材
% S& u; n* Z1 q0 w取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。
! g* c7 o8 r) u* Y- R, L( E2．材料处理        1 ~% n+ e- }7 p! B
（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。
1 X% o4 F- c3 g% _2 S. {0 X/ F（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。1 N+ B2 N* B! c9 m, a
（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。
; f: O# F0 ^' j8 y6 {3．细胞培养
) Z" j9 w2 j# M& o4 \（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。
% _9 z4 e9 W* l1 ]% c: _（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。" ^1 y3 H9 M" W2 q+ }1 i
（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。
4 }/ a1 b6 V  l（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出6 u$ `$ }; a+ w; g# z