哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

echowdk

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- Y( U8 t. a5 L* x1 z" X最近想要做一批。提前谢过。

牙牙丫丫123

1．取材( S- S8 x! G7 M. Q4 z; n; z6 l/ _1 m
取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。
+ e6 C8 x3 x* P) o2．材料处理        - d+ v' q  E+ e) O
（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。
4 f6 d5 N' ~3 z/ D  e- N/ d（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。
  k1 w2 q' r* E6 w' ]" W（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。
) d/ G! |( y( w/ K+ ?; U# w3．细胞培养! i: B0 U: G2 c7 o4 U
（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。
5 P( d" I% i3 I& L（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。# O* J( d4 l* n) {+ k8 L
（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。
. v  g0 F  l- P* }（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出
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