哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

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最近想要做一批。提前谢过。

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1．取材& k. ^! c- J6 h
取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。( ~5 m/ a1 J6 Y  U* z; j
2．材料处理       
$ ^2 @) h8 v5 Z# W% z5 w（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。8 k/ e) o( s- V$ |4 ]7 L3 E2 ~% d
（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。
# w7 Q' q7 u; n（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。0 I$ G( d( i: }2 r$ B" K; @
3．细胞培养
: w/ F; C* E' d1 B6 }3 W" x8 s（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。; s: Z6 x% e8 u( i$ U
（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。
% ]% A3 C+ A: c' A0 O6 ?7 L% Q（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。
" c( J; |. Z+ f+ b  b. i$ b  L$ P（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出* ]0 l# A2 p: A) P; e* `( L& T