哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

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1 c; u, V3 k0 y) e' i" p最近想要做一批。提前谢过。

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1．取材
$ `" e. Y, z5 K, w取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。1 _" I4 E; q1 \3 K( P
2．材料处理        5 }& q4 b7 R+ a9 G
（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。
5 P* M' q% U- t9 c3 [/ i9 J8 c（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。
, A; X6 U& e( m2 r（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。# o: n4 Z. e# f* a1 S" R9 A5 {, k
3．细胞培养- u& g: G4 v0 j) B  @' i8 D
（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。, u; v8 R9 }1 h* r; [+ ]
（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。  g/ Y6 g! {+ O. k8 n" v+ P
（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。+ E! i% ~- r0 v* i
（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出
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