哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

echowdk

如题，哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞，能不能把protocol分享一下。; d) Y/ w# _/ O: c& \; w/ _
最近想要做一批。提前谢过。

牙牙丫丫123

1．取材0 j) F2 X) g7 d( W* |
取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。5 `, r: o/ |% Y
2．材料处理        7 T0 ^, ?. _0 ]
（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。
/ ^* L8 L( H$ ~. X0 [（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。
1 f: q0 }) g$ ]; J9 D（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。
  t. F" S, X' Y" T2 Y3．细胞培养
. r- ]( m4 k. m- w$ k! t（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。/ `3 g1 L: a4 z# e$ |% b
（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。
4 T3 p. f+ L8 s/ ^  ]（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。- f  `! g" P. D+ m% D
（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出
* h, S) X7 E4 b9 S: s- m