含细胞因子的培养基污染了，过滤后还能用吗？

ZHUTZ

含细胞因子的培养基污染了，扔了实在可惜，想用0.22微米的过滤器过滤下，过滤后能继续使用吗？有人有这方面的经验吗？谢谢

Donnies

不要用了，换个新的，0.22um的过滤器过滤的细菌也很有限的，不是所有的都能过滤的，而且如果所剩的培养基不多的话，直接扔了，如果还剩很多培养基的话，过滤之后，可以先培养一下，用其他细胞培养试一下或者直接把培养基放在孵箱中看看有没有污染，如果没有的话，可以使用。

deshenglll

污染了还是不要用了，里面成份变了。对细胞生长有影响。

rhmm

最好不要接着用了，别丢个西瓜捡个芝麻，做实验该省的省 不该省的省了到时候只有浪费时间和精力、金钱

ZHUTZ

7 ]  M- P( u$ {
谢谢各位的中肯建议了。我培养了一下过滤后的细菌阴性。但考虑可能存在的内毒素等影响，想先用该培养基养下肿瘤细胞试试看能成球不，反正细胞很多，真正做实验时不会再用了。我的EGF使用无菌水溶后用0.1%BSA的PBS分装冻存的。bFGF是用TRIS溶解的。因为BSA和TRIS配前都是有菌的后来用0.22滤器过滤的，所以增加了污染的机会。大家都是怎么分装的？有没有什么好办法呢？
+ ~% G" Y/ V( M0 S

ZHUTZ

谢谢各位的中肯建议了。我培养了一下过滤后的细菌阴性。但考虑可能存在的内毒素等影响，想先用该培养基养下肿瘤细胞试试看能成球不，反正细胞很多，真正做实验时不会再用了。我的EGF使用无菌水溶后用0.1%BSA的PBS分装冻存的。bFGF是用TRIS溶解的。因为BSA和TRIS配前都是有菌的后来用0.22滤器过滤的，所以增加了污染的机会。大家都是怎么分装的？有没有什么好办法呢？

lazyworm

同意楼上，还是直接扔掉吧，内毒素、支原体、病毒等是可以透过滤器的，所以过滤也不一定能解决污染。

zb_ming

简易楼主可以试一试的，毕竟扔了可惜。楼主可以在过滤以后不要直接用来培养细胞，过滤后的液体取少量培养箱孵育72小时，然后观察，如若液体仍然清亮，说明液体还可以用。此时如若还不放心，可以做个对比实验。既然楼主可惜液体，想必量不少，否则直接扔了得了，哈哈，因子就是银子呀，贵啊，哈哈。

寒山拾得

直接扔掉，细菌分泌的东西会更影响你的细胞。, N9 [) z2 r) X4 m5 C
接着往下做会浪费更多。

ljs

我个人强烈反对楼主的做法。理由如下：( j2 n. C) n- c8 w
1.既然培养基被污染了，即使采用0.22μm的过滤，楼主在培养的过程中遇到问题，如何排查原因？
8 C2 j7 |+ i0 q4 {2.培养基被污染，请楼主确定污染类型，细菌污染？支原体污染有没有？, `& D$ l2 y6 \5 m; y
3.培养基污染后理化性质是否改变？渗透压、PH值、离子强度、培养基内的细菌是否会释放一些因子进而影响实验结果
& u1 n, C$ {  R% ~/ P9 z( u" t4.楼主的节约精神值得学习，但是科学实验不能凑合。