细胞免疫荧光问题

shxwang

请教大家为什么分化5-6天的神经元也会被胶质细胞的marker GFAP给染上，有没有什么mraker可以将神经元和胶质细胞区分开？谢谢！

等待feng

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0 Q3 B( E. P. P7 u" G5 ^/ I0 a! f/ I( m  F7 x
你的问题解决没？我的也是抗体把不同的细胞都给染出来了。。。。没法进行下一步

shxwang

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; n! K. T1 q7 K, p0 w0 }' s7 [( r; p
' s( y) E0 H! M( d& K! p谢谢~我之前试过β-III-tubulin，它可以将神经元和胶质都染上。。。请教一下哪种GFAP会好一点，我们实验室之前买的那个可以将两种细胞都染上，谢谢啦~现在非常苦恼的就是两种细胞在形态上已经有差异，但是就是无法用marker分开。; x+ {' a1 J% D2 L5 o

shxwang

回复 如来的观音 的帖子2 A, Q" I1 k% e$ x/ J4 K

, C& K! q+ L( j3 c谢谢~我上次用了β-III-tubulin，但是发现神经元和胶质的形态已经有明显的差异，但是这两种细胞都能被染上β-III-tubulin，不知道为什么。。。

shxwang

回复 lxm5668 的帖子% P: x. M& B! T1 V
& ^' Z7 t  w0 S' O
谢谢~但是我的细胞只分化了5-6，还不是很成熟，不知道能不能染上。

cortex

应该说用β-III-tubulin或者Map2标记神经元,用GFAP标记神经胶质细胞是可以分开的.你应该考虑你GFAP染色是否是假阳性.据我所知兔多克隆抗体GFAP很容易出现这种情况.

如来的观音

NSC分化5-6天可能有部分分化为胶质细胞，区分神经元和胶质细胞可用神经元特异烯醇化酶或β-III-tubulin（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）

lxm5668

把神经元和胶质细胞区分开,找到他们分别的特异性表达蛋白就行了。( e6 x: Z/ _$ ~  X  w4 S
神经元特异烯醇化酶（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）分别是他们的代表性蛋白。/ p/ j* l. e9 Q
S100b 是标记雪旺细胞的。

birdflubirdflu

回复 dianying 的帖子
% u* j. L. A; N: {3 e* ]- R/ ], f2 A
打错了。。 我本来想打GFAP的，sorry.

shxwang

回复 birdflubirdflu 的帖子
. g. k, S* \) |5 G6 @6 A
+ M  E/ e6 ^0 w  j7 i谢谢。但是S100b 好像会被分泌到胞外，这样还能染上胶质吗？我查阅了一些资料，但是很难找到definitive astrocyte markers，好像一般都是GFAP，你可以像我推荐一下么。十分感谢你~