细胞免疫荧光问题

shxwang

请教大家为什么分化5-6天的神经元也会被胶质细胞的marker GFAP给染上，有没有什么mraker可以将神经元和胶质细胞区分开？谢谢！

birdflubirdflu

回复 shxwang 的帖子3 f7 M! Q' X4 \# ~: G* n) s

, B, S& |0 h! U, s# B6 y请注意神经元的progenitors也是表达EGFP的 ，所以你可以使用S100b 染，或者使用definitive astrocyte markers。

dianying

回复 birdflubirdflu 的帖子6 S  N! Z( M6 d' j) o' Q7 \2 O

' k/ `6 s( Z9 F7 r' M8 B) TEGFP 和 GFAP 都是啥子关系？给补补课呗。

shxwang

回复 birdflubirdflu 的帖子6 }% l9 l3 B& K

- t- `$ g; O7 q谢谢。但是S100b 好像会被分泌到胞外，这样还能染上胶质吗？我查阅了一些资料，但是很难找到definitive astrocyte markers，好像一般都是GFAP，你可以像我推荐一下么。十分感谢你~

birdflubirdflu

回复 dianying 的帖子: v3 ]% y  x3 D  m
3 U9 Z  O2 q3 p! e1 ]. N2 N0 Y1 k
打错了。。 我本来想打GFAP的，sorry.

lxm5668

把神经元和胶质细胞区分开,找到他们分别的特异性表达蛋白就行了。
% g* L. }4 ]  y1 T& R3 g5 R; `神经元特异烯醇化酶（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）分别是他们的代表性蛋白。. q& z7 O5 C& {5 x; E
S100b 是标记雪旺细胞的。

如来的观音

NSC分化5-6天可能有部分分化为胶质细胞，区分神经元和胶质细胞可用神经元特异烯醇化酶或β-III-tubulin（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）

cortex

应该说用β-III-tubulin或者Map2标记神经元,用GFAP标记神经胶质细胞是可以分开的.你应该考虑你GFAP染色是否是假阳性.据我所知兔多克隆抗体GFAP很容易出现这种情况.

shxwang

回复 lxm5668 的帖子
( ^' `- t1 X( c. \3 y. k+ e( Q3 C: ~3 {  F- _4 j, I) l0 w
谢谢~但是我的细胞只分化了5-6，还不是很成熟，不知道能不能染上。

shxwang

回复 如来的观音 的帖子6 {7 [9 |: L, Z" S: p5 @& X* p( e
$ [& E; l5 w) |: y
谢谢~我上次用了β-III-tubulin，但是发现神经元和胶质的形态已经有明显的差异，但是这两种细胞都能被染上β-III-tubulin，不知道为什么。。。