脂肪干细胞养不出来

tangyihan

回复 loveless 的帖子
7 ~% l. |- g( A# s/ I
* R9 u5 q: k, W, c可以考虑:. r: C% ~: O" d. i1 N
1.用0.2%胶原酶。
& ~5 i" j- Y; ], H  s: G3 r: [2.消化时间延长为1小时，这也是nature protocol上建议的消化时间。0 s8 ~) h6 V. @' V1 R( R
3.离心后用100um filter 过滤。
" O5 I) I+ K0 B  F! F2 _# A! p4.你应该把步骤些详细些:不停的震荡是什么意思？没见过protocol这么写的。/ r: ^: t7 y: E' u
5.发帖之前建议先看看其他帖子，园子里多着呢。# _0 K, k$ e+ ~9 n7 b4 y% E& g9 h

& f$ n' C3 K6 s$ B0 k祝你成功！

tangyihan

回复 loveless 的帖子
+ v) ]' U" f' z. |/ m6 @
' g1 b' e1 e' Q3 S: b# B9 R用0.2%的胶原酶消化

tangyihan

回复 都市青蛙 的帖子
, V& M8 m) d, e: Q  j% n, y
0 Y2 d7 _- \) E个人觉得胶原酶浓度也不是太重要，虽然文献上基本都用0.075%或者0.01%的胶原酶消化，但我每次消化时用0.2%的胶原酶也很好，2g大鼠脂肪组织可以取到10的5次方的细胞，觉得胶原酶溶液体积应该在脂肪组织体积的3至4倍的样子，充分与脂肪组织混匀才能消化彻底吧，如有不足之处还望各位指出...