无血清培养的密度 - 肿瘤干细胞专区干细胞之家



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liuwen

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楼主

发表于 2012-9-27 20:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

打算从肿瘤细胞系里筛选干细胞，最近在做无血清培养，用的是1640培养基在六孔板上培养，密度是5000个/ml。但是一周以后也没出现细胞球，而且看起来细胞好像死了。请问大家都用什么密度阿？

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沙发

发表于 2012-9-29 15:48 |只看该作者

不知道你做的什么肿瘤的干细胞，我看过文献上胶质瘤的，一般是10的5次方到6次方个

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liuwen

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藤椅

发表于 2012-10-8 19:00 |只看该作者

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我的细胞是淋巴瘤的细胞系，试过10的5次方个，不怎么长，不知道是不是添加的生长因子不对

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jojomayer

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板凳

发表于 2012-10-10 03:59 |只看该作者

回复 liuwen 的帖子. L) _. C- w* S8 V
m; w; [8 o6 [3 b& S) B$ @& v; x
你是什么配方？文献是什么配方呢？

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wyeric

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报纸

发表于 2012-10-13 12:27 |只看该作者

brain tumor stem like cells, 20ng/ml EGF,bFGF,2% B27, DMEM/F12 1:1 medium.

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liuwen

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地板

发表于 2012-10-16 17:56 |只看该作者

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20ng/ml EGF,2% B27, 5ug/m Insulin. RPMI1640.没找到关于淋巴瘤细胞无血清培养的文献，而且我是犬的淋巴瘤

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617507911

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7楼

发表于 2012-11-19 16:51 |只看该作者

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2 H9 n& f% { n1 n% t9 a Z8 [
我想应该是你接种的细胞密度太小了吧，其实细胞也有一定的密度依赖性，假如你接种的密度小的话，最好的情况可能就是细胞基本处于静止状态，或者基本上死亡。所以我觉得不是你的培养基的问题，可能主要原因还是在于你的细胞密度，可以大胆试试不同的密度接