人ips为何容易分化

若兰汀

本人从南方干细胞库获得一株人ips细胞，连续两次都出现分化状态，而且都发生在P30时。使用的是Matrigel配合MeTesR1的培养基。实在搞不懂为啥总是分化，培养基和滋养胶都是最好的了，这细胞胞们还是不给力，求助有经验的人分享一下这种细胞的培养心得。多谢了！

第一心音

我个人觉得是饲养层的原因，饲养层不能用太长时间

也行天下

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我昨天又查了一下技术手册，应该是基础培养基和添加物混合之后的完全培养基在4度只能放两周吧。1瓶400ml的基础培养基我们在两周内肯定用不完。我们都是先把添加物分装成5ml或10ml后冻存，根据养的 hiPS细胞的数量，每次配25ml或50ml，1周之内就用完了。

shuishan

我之前也遇到同样的情况，最后传代后12h内换一次液就好了。

若兰汀

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! u$ B: H2 L8 R# y我查了一下，这个METESR1的培养基开封后在4度只能放两周，而且和它同一个kit的血清替代物4度解冻后，最好一天内就与培养基进行混合。混合后的培养基在-20度能存放6个月，我之前的培养基开封后用了近一个月，我初步怀疑这种超出保质期的培养基不能有效支持细胞的干性造成分化，但细胞的株的状态可能占了主要原因，希望能帮到你，共勉！

也行天下

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我们养的hiPS细胞，和你的方法一样，也是用Matrigel和mTeSR1养的，到P30左右时也是分化的很多。还有一种现象就是P30以后冻存的hiPS细胞复苏后第1天细胞状态挺好，可是转天细胞就逐渐飘起来。不知你有没有遇到这种情况。以前我觉得可能是mTeSR1的问题，现在看可能还是细胞状态不好的原因。

larrylord

细胞不好呗