求助：进入了细胞怪圈

等待feng

九月份做了几次大鼠的脂肪干细胞 原代  挺成功的。但从九月下旬开始就开始各种污染或者细胞不贴壁。。。。唉。。最近几次原代做完就各种浑浊。。。。。到底是怎么一个情况呢？各位大师。。。。都快对养细胞没信心了。。。自己感觉无菌操作也还规范。求大家给点意见。。。

littleeley

如果浑浊的很快 考虑培养液污染 如果是操作过程中污染细菌，一般菌量小，出现浑浊表现较晚  先把培养液、各种洗液及消化液换新的 试试

等待feng

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! b. O' B. p2 {0 }; Y$ I* F
. |' I* Q( c3 l3 H9 b* ^原代不是一般都是浑浊的吗？？

hcoohboy

红细胞和死细胞造成的浑浊和细菌污染是不同的，建议在镜下仔细观察，并请有养细胞经验的实验室师兄师姐帮忙看看。或者你上一张图片来大家看看

littleeley

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' {; r' j; t9 x
0 k% h& c  p+ R1 H  |' L6 I我所说的“浑浊”特指污染造成的浑浊

等待feng

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- }% b) T) N+ k5 G
- y6 b- Q6 P1 [' o/ h. a哦  那你做这么久有没有一段时间经常污染呢？我最近经常污染，觉得都对养细胞失去信心了

tangyihan

取到组织后用含1%抗生素的PBS或者生理盐水至少洗三次，再用不含抗生素的PBS或者生理盐水洗一两次，剩下的就看你的无菌操作了，当然处理细胞的环境也非常重要..别灰心，大家都这么失败着过来的，祝你实验顺利。。。

等待feng

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% g' i0 M* \; G( r9 J
( y, I% F8 b0 X1 U兄弟  泪奔啊、。。。。啥也不说了    感动

deshenglll

上图啊。只靠文字说不清楚。