最近要开始去小鼠的骨髓细胞了，一些疑问还希望前辈们不吝赐教，谢谢哦！

星火燎原

1、熟能生巧，两个人配合着* p  f( o; g6 v# d0 h
2、尺度尽量小，但也别太小心了
- F: \# v, p$ [3、我用2ml注射器，冲的过程中先用针头来回穿梭几次，要不压力太大/ w8 S. e; {; @9 x8 j: p) l
4、剔除的过程中注意无菌，之后用生理盐水冲洗一下，不需要用酒精泡，直接冲就行
& [7 j3 V0 @; l) H5、我是在培养 皿中冲洗，冲的时候注意力度，冲到骨髓腔发白为止（用止血钳掰断），之后再转移到离心管，不需要滤膜过滤，沉淀pbs悬浮，ficoll分离7 S0 r2 P: W5 u4 R, }- l. a# \
6、洗涤2次之后用培养液悬浮细胞，48h后半换或全换（看情况），换液迟了会有很多杂细胞贴壁，影响干细胞生长，4~5天出现集落% l- S! s/ H9 ~4 U3 s( T4 T
7、吹打均匀情况可在吹打之后显微镜下观察成团细胞多不多，别吹得太猛0 y" _- r5 ]" X/ ?: y# P  x
8、冲细胞用培养基（加血清更好）更好