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以前没做过这方面的实验,最近要开始去小鼠的骨髓细胞了,一些疑问还希望前辈们不吝赐教,谢谢哦!
7 k' q7 J9 ]- n* G* v5 M查了好一些资料,有以下问题:5 q: ]5 ?! e ^# E
1:取出小鼠骨的时候上面都附着不少的肌肉和结缔组织,剪的时候很费力,有没有什么技巧?或者是一个熟能生巧的问题?9 }, j3 r# N( C
2:小鼠的股骨,胫骨其实都挺小的,要剪掉两端,这个尺度怎么控制?而且发现1ml的针头直接穿刺也不太容易。' q& C! @% i( p: [: a
3:有不少帖子说1ml注射器对细胞损伤比较大,那么这个损伤是针头还是针管的容积带来的?因为有看到一些同学说把1ml的针头换在5ml的针管上就能得到很好的效果。
3 b' F& T) [2 J; F4 p W2 T4:看到泡酒精感觉长见识了,不过还是有个小小的疑问,前面有同学说,不能连带肌肉泡,那么既然肌肉都已经剔除干净了,还需要泡酒精吗?不如直接开始冲细胞了?( A* i8 @# i& m3 ^6 _0 O j6 h
5:冲出来的细胞液是直接冲进离心管/培养皿中吗?不需要滤膜过滤一下?: b: s" q1 x- J9 q2 H- Z
6:裂解红细胞的时候是在常温下吗?
! d) ?8 e: U; h) c7:有没有专门的资料介绍小鼠的骨髓细胞?取出骨髓细胞以后,怎么判断干细胞?贴壁的细胞就是吗?
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暂时想到这些问题,目前实验室没有师兄师姐可以请教,很多细节都不懂,所以只能求助大家,万谢! |
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