小鼠ES怎样才能无Feeder培养

cochongg

JM8怎样能在，
0 s: d9 l, ^! A. _' O有明胶无Feeder的板上，, G% t: j  k; r, S; @- }+ J" N
培养一到两代，3 D( q; S  |1 T: \& L6 c
分化尽可能少。
. v! B! D, N: Q: q, m$ o4 s0 e
+ D) ~) ~" G5 q% O% `1 M" v培养基添加LIF的浓度要加大吗？求具体方法。

zpzp0312

应该可以

cochongg

回复 zpzp0312 的帖子, U8 G1 O  L3 A

% c% K) g& Z& s我尝试过，去除Feeder之后，Es细胞第二天就出现分化，不能形成之前的克隆团

sisi48

尝试用2i （2 inhibitor）吧

cochongg

回复 sisi48 的帖子9 U8 B- {# U; ~7 a9 y

$ `5 K! j0 n4 ?4 _可否具体一点，，，，或者你是怎样做的，，，，提供一些数据参考

your1024

mark一下留个关注，也在考虑这个问题。

zpzp0312

回复 cochongg 的帖子
1 k5 L: s# Y1 a( z
& d6 C- I/ K8 W% q1 @我觉得可能是状态本身就不好
* O1 E& F  l) ~" O9 D8 P在饲养层上，分化的细胞不易观察到，所以去除饲养层后就明显很多了
9 j' p* k) ?+ g/ x9 i另外可以考虑使用一些现有的可以在无饲养层条件培养的细胞系
6 d7 R7 U4 `9 e. Q. L8 R按说JM8里面应该有适合无饲养层培养的

cochongg

回复 zpzp0312 的帖子" m3 c% b) v) V% m, y: P
# ~9 s+ S& q: Q7 E
转移到无Feeder之前JM8细胞状态很好，，，，因该说非常好，细胞团大小适中，边缘明亮，无重合。就是在无feeder的培养皿上，分化太严重。
% a& s& S: x6 T* R1 g$ {4 u) O; f$ ?3 V/ q; [
另外补充一下：在无饲养层培养过程，连克隆团都形成不了。直接分化成纤维样细胞，贴壁，类似MSC

cochongg

回复 zpzp0312 的帖子- C' d; n% `/ n# w& T% ~
. P+ X* ~; I, `) n
如果你有做过的，请提供一下适合无feeder的JM8类型，还有培养条件（培养基添加哪类因子，以及浓度等）

cochongg

回复 your1024 的帖子. j7 q; J2 ~# Y
, ]  R2 g1 _0 e7 r
请问你有尝试做过吗？？