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293T养不好,前辈帮忙来看一下吧!   [复制链接]

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发表于 2012-10-17 09:27 |只看该作者 |正序浏览 |打印
293T本来状态不好,昨天传代了,1传4,明明吹打成单个悬浮细胞了,今天早上来看,细胞都聚成一团一团的,而且还有很多黑色的东西,请前辈们指点指点,这细胞怎么才能养好?
2 \# f  m# K6 I3 w2 `
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发表于 2012-10-21 02:55 |只看该作者
这个细胞只能扔了。我在-80放了三年的293都比你这个好。
2 C- B* y+ [2 b2 {# P) Z用于干细胞,包装病毒用的293千万不要有支原体的污染。滤膜也没有。1 I! |- }0 T+ U+ m$ {  @! P- c
不要用抗生素。 有条件也该用单独的培养箱,和其他细胞分开。每个月都应该查一次。 6 {5 ~' u3 m/ M/ n2 E& D- D- R* _' e
. H$ _1 K; d4 I% O" z! o6 i3 u
0 p) r) L/ r+ v. l( q+ u
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发表于 2012-10-19 09:04 |只看该作者
解冻新的吧 这绝对是不行了
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发表于 2012-10-18 19:38 |只看该作者
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各位大侠都是从哪里买的的细胞?我都买了两次了,都是刚开始还行,后面一团糟,怀疑是细胞本身原因
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发表于 2012-10-18 17:40 |只看该作者
这种情况不是污染,但是不是污染,是细胞本身不好了,不能继续用了,建议赶快扔,扔了再买。
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发表于 2012-10-18 11:50 |只看该作者
293T细胞还是挺好养的,一,密度不要养到太大时消化,这样状态不好;二,胰酶浓度不要太大,或者如果用0.25%胰酶的话,加上胰酶铺匀后要立即吸出,用残存的胰酶完成消化,看到变圆后立即中止。这些黑点如果不是污染就应该是细胞死亡后导致的。
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发表于 2012-10-17 15:24 |只看该作者
消化过了吧,还有就是培养液中杂质太多,全部都换一遍吧
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发表于 2012-10-17 14:26 |只看该作者
回复 jihaijie 的帖子
& n% N; s& h0 D; d9 l1 H8 ~+ H7 d, b0 w
好。上面有个师姐说的支原体感染,这个概率大吗?需要把试验台彻底消毒一遍吗?
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发表于 2012-10-17 14:24 |只看该作者
莫急,细胞不要总动,放上3天或培养基不发黄就不用动
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发表于 2012-10-17 14:22 |只看该作者
回复 jihaijie 的帖子
2 I3 v/ f( J! h3 {6 e; w' H% Z# i0 u
就是啊,但是我怎么养不好呢
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