细胞培养液中、培养瓶底部出现的小黑点是什么神物啊？多选哦

yuhaoze

最近养细胞，不管换液的时候怎么洗，第二天在培养液中都会出现小点点的杂质，另外养293T的时候，传代后细胞液很脏。不管是在咱们网站还是丁香园等等的，看到大家对这个东西讨论甚多，有黑胶虫论的，有支原体论的，也有碎片论的，从参与度可以得知，很多很多人深深地被这个问题困扰着，但这个到底是什么一直没有一个公认的答案。
( f4 S# h" u' i2 z+ X' w) b. [& r大家参与投票吧，选项肯定不全，大家对这个问题还有什么解释，就在下面留言吧

yuanyecat

小黑点可能是黑膠蟲啊，你用高倍顯微鏡看看啊

baicaikua

我始终认为是消化的时候损伤到细胞，应该是细胞碎片和凋亡的细胞，特征是污染物比细胞小，且形状不规则，静止时不会移动，偶尔有大片是碎片聚集的情况。
. m% j0 ?6 A6 \+ I4 @换液后无法清除干净，但会减少很多，但继续培养又会增多。
" U2 L# {/ L. }& |! r" `- B黑胶虫一般是比较小的，形状有一定规则，且会移动。
2 e" ^+ A4 B4 `; Q) O( M' F支原体的话一般是细胞生长缓慢，但是培养液里没这么多脏东西。。。

922922922

回复 yuhaoze 的帖子) I. K# Y7 i/ T

+ d6 R1 k8 z% Q0 K9 y  a) R是黑胶虫的可能性很大。我记得有一种试剂，可以专门去除黑胶虫，而且一旦处理后就再也不会生长。

jojo1988509

会动就是黑胶虫啦！

l19rna

我无血清培养基养的human ES也出现小黑虫啊！细胞又比较宝贵，怎么去除比较好啊

Latina

我也遇到过这种情况，问老师说没事，但是我很担心，因为是筛选稳定细胞系的过程中，不然得重头再来。里面的黑点看着有时候还在动，我于是每天拿PBS洗2-3次，洗了大约一周后就好很多了，后来就没有了。

lic126

个人不觉得是支原体。。。因为我们一般细胞的培养液会送相关检验，CTUU，也就是支原体衣原体，至少现在没出现过阳性结果。但像这种小黑体现象却偶有发现，个人感觉还是血清批次的差异或者细胞碎片。。。但一般不影响前几代细胞的生长，之后往后传，没具体针对着实践过。

922922922

回复 yuhaoze 的帖子
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2 [6 @3 d% R# n: P! `' @我们的经验是如果这些黑色的小点，随着细胞的生长不断增多，而且细胞也逐渐死亡漂浮，那么很有可能就是黑胶虫了。但是 有时，换液后这些黑色小点就明显减少，而且不再增加，应该就是细胞碎片的布朗运动了。

zhu-fu

如果是黑胶虫污染的话，很多情况下都是假的胎牛血清惹得祸，最近做实验遇到这样的问题，才发现是GIBCO胎牛血清的问题