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yuhaoze

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楼主

发表于 2012-10-21 16:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

想请教一下9 `5 m/ C) F4 A$ z
pCMV-dR8.91 和 pCMV-VSVG是高拷贝质粒，还是中低拷贝质粒，未提取质粒，大肠杆菌培养过程中用不用加氯霉素？

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ying

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沙发

发表于 2012-10-22 09:39 |只看该作者

高，不用加。放心抽吧～

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藤椅

发表于 2012-10-22 09:41 |只看该作者

VSVG质粒比较小，用量也少，可以少摇一些。8.91质粒大而且用量大，建议摇的量是VSVG的3倍左右，到时候正好差不多一起用完。

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yuhaoze

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板凳

发表于 2012-10-22 14:33 |只看该作者

回复 ying 的帖子

看书上写的pBR322来源的质粒都是松弛型的，我问了个公司的技术支持，说pCMV-VSVG和pCMV-dR8.91都是松弛型的低拷贝。$ P; t% K7 {. g+ g* l( b+ \
我还是准备按照分子克隆书上写的加氯霉素，但是要求OD600=0.4的时候加氯霉素，也太低了吧...为什么不能摇到OD600=2.0以上再加氯霉素呢？