10%PVP好稠啊

jhxppm

用CZB-Hepes配了10%PVP（36kD，Sigma，PVP360），配完以后稠的跟浆糊一样，用0.45um滤器过滤都滤不动，难道大家用的都是这样的吗？

wbj1983

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' t5 W0 k. X" W- n+ \% F
您好！这个问题还是很好解决的：不管用CZB-Hepes、KSOM-Hepes还是M2，先把基础培养液量好上面加称量的sigma PVP360，然后4℃过夜，再用0.45um滤器过滤，分装-20℃保存备用。您可以试试，我们这么配的绝对没问题，希望对您的实验有所帮助！

jayhaoli01

充分溶解是关键，你得放一晚上，别配完急于过滤，刚配完的时候就是很稠，放一晚上就好多了，0.45um过滤没问题的，都是这么滤的。

jhxppm

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% t/ N9 C4 [* N我配完以后在4℃下放了6h左右吧，期间还拿出来震荡了几次，感觉还是挺稠的，是不是放的时间还不够呢？

jhxppm

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我就是按照你说的方法做的，配好以后还是特别稠，我在18mLCZB-Hepes里加了2g  PVP。另外PVP感觉密度好小，2g称出来很多

zpzp0312

配制时要用枪头充分搅拌开，变成糊状，在放到冰箱里静置溶解$ F% w0 |' C, i: b/ z4 l
否则单纯在四度静置也不好充分溶解

jhxppm

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是的，我配制的时候就是先用枪头搅拌，让PVP尽可能多的溶解，然后放入冰箱静置一晚上，第二天液体就清亮了，效果比之前要好一些，只是配好以后用来洗针时还是感觉有些稠，吹吸不太灵活，有一定的迟滞，这种现象正常吗？

zpzp0312

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0 a1 t1 K# c# v' ?
& Y) Y' R+ v& _$ r* \. Y你做的是单精注射还是什么？

jhxppm

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6 H: t" B, w7 I1 J$ ?
体细胞核移植

zpzp0312

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1 y7 p1 d5 W! u2 b: m- P' b5 h0 S2 @9 N9 c
那你可以适当把浓度调低一些，调到5%~7%
0 r( P4 C. D0 R; \只要PVP能够避免黏针，浓度越低越好，太浓有时可能会在吸取时控制不住吸很多进入注射针，反而弄脏注射针& l# m! T5 m/ o" V
如果是单精注射，不用PVP也可以