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楼主: yuhaoze
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请教,为什么我用碱裂解法大提的质粒电泳只有两条带?     [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-25 08:06 |显示全部帖子
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回复 sanna1 的帖子4 ?1 ?7 C' a& `. y4 X4 B# _
3 I( k3 n: a. ]2 \- h  ^- e3 ?& k
因为有超螺旋,线性、和缺刻3种质粒形式,他们的电泳速度不一样,线性跑得最慢好像,9 T7 d& g* |" w. z6 W% N
所以...& ^  a; Z6 k  H4 @+ I" a
3 g0 P# a7 ~' `' F; m
补充内容 (2012-10-25 08:09):( n# b* \% G% ?& z4 ~; j
如果是瞬转,建议环形质粒转染,因为环形质粒更容易进入细胞,这样可以提高转染后阳性率.
/ ^: y8 X  |/ c7 v( G有人说的:如果是挑稳转,建议线性化以后转,因为稳转不要求转染效率,线性化的质粒更容易整合到细胞的基因组中,这样可以提高克隆
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沙发
发表于 2012-10-25 08:53 |显示全部帖子
回复 yuhaoze 的帖子7 {4 Q  S+ w% Q& L# I) A
8 l  K/ t6 b& h; P
可以再做单酶切
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