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求助human fetal mesenchymal stem cell 培养 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-26 18:30 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
  有谁培养过人间充质干细胞?(此细胞复苏,传代,冻存的注意点有哪些?) 因为我即将培养此细胞,希望提前获取经验!!谢 谢
: t4 g7 p1 h2 i3 D2 D) F( F* h 1 V, u$ M/ C+ `1 K( O  x) g: W, ]6 M& u
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沙发
发表于 2012-10-29 10:53 |只看该作者
我们这做MSC

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藤椅
发表于 2012-10-29 20:29 |只看该作者
回复 回到从前 的帖子+ N; s4 n- `6 r
: \2 V9 t+ |' W; k6 y1 Y4 n* v
呵呵,请问一下,就是间充质干细胞传代时,用含EDTA的胰酶消化后,要在进行离心吗? 有文献说要离心处理,之前听师姐说离心会损伤细胞,请问你们实验室怎么做的啊!谢谢了   
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板凳
发表于 2012-10-29 20:58 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
msc作为贴壁细胞,消化后是要离心的' T. L8 z+ H0 j! V6 `  e# j
至于你提到的细胞损伤,只要不超过1000rpm,对细胞的影响几乎可以忽视不及
4 K# N% `4 ?" \& K2 p8 r. R况且,你在原代用percoll分离的时候,离心的速率那更高了8 Y2 ]/ T4 d! C) N. Q/ m
对于人msc,没有特殊的交代,你就当贴壁细胞系养就没有任何问题
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报纸
发表于 2012-10-29 21:08 |只看该作者
回复 sysuhoo 的帖子$ Q) A) a' o4 t& i% t: P/ [' t
6 @) y- W. r! ^. U. t  N
谢谢你!就是人间充质细胞用EDTA的胰酶消化时大概需要多长时间的?因为我们是买的细胞株,好贵的,所以我必须询问相关注意点···
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地板
发表于 2012-10-30 07:49 |只看该作者
人的很好消化,一般不超过5分钟就能下来,放心做吧: C! ]( Y% ?9 w3 {- ]" w
不过就我所知,间充质干细胞由于本身的自我更新能力具有增殖能力,所以也不能说是细胞株; }. f, S# s; g
还是有代数限制的,所以当代数很高以后,多向分化能力会受到影响
& b% G$ ~0 S) {" l5 E( G' M建议你在代数较小时提前多冻存,另外传代保种的不要密度太高,否则也会分化
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发表于 2012-10-30 13:47 |只看该作者
回复 zxh_890808 的帖子
, }) _* V& J8 b6 @5 C
; [" @  X0 N7 q; F我们这离心 主要是消化的时候对细胞的损伤大吧
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发表于 2012-10-30 18:32 |只看该作者
回复 sysuhoo 的帖子
0 `+ p( c; r0 |1 h! B! V+ P& v9 k* y0 Y% t
非常感谢你的意见···呵呵···既然尽早冻存,我这样做可以吗,就是我复苏离心加培养液混匀后,就分为两瓶,等一瓶长得大概百分之八九十就冻存,另外一瓶长得差不多了就传代,然后相继冻存····
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发表于 2012-11-1 10:33 |只看该作者
回复 zxh_890808 的帖子; f- w( ]0 `& z) g' z* y
/ T2 T8 }  V# w) P6 K1 L: N' Y
嗯 你这样做比较保险

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发表于 2012-11-5 20:12 |只看该作者
回复 回到从前 的帖子0 R2 d7 n1 `# k. p
! e; G2 o4 n9 [& ^3 T2 l
请问一下,你们人间充质干细胞冻存时,冻存液成分的比例是什么?!
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