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求助human fetal mesenchymal stem cell 培养 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-10-26 18:30 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
  有谁培养过人间充质干细胞?(此细胞复苏,传代,冻存的注意点有哪些?) 因为我即将培养此细胞,希望提前获取经验!!谢 谢
( O6 G. Y: E2 G : j) i2 S5 {, l- |
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沙发
发表于 2012-10-29 10:53 |只看该作者
我们这做MSC

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藤椅
发表于 2012-10-29 20:29 |只看该作者
回复 回到从前 的帖子
& G1 j2 H  z( [( u5 |2 ^) W) P2 _7 z8 |+ [5 p
呵呵,请问一下,就是间充质干细胞传代时,用含EDTA的胰酶消化后,要在进行离心吗? 有文献说要离心处理,之前听师姐说离心会损伤细胞,请问你们实验室怎么做的啊!谢谢了   
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板凳
发表于 2012-10-29 20:58 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
msc作为贴壁细胞,消化后是要离心的" K. S$ c# H& [1 X3 A; H/ u$ }9 H
至于你提到的细胞损伤,只要不超过1000rpm,对细胞的影响几乎可以忽视不及( y6 H. t  A# Y$ b
况且,你在原代用percoll分离的时候,离心的速率那更高了
: J' g% `7 L, i0 g" J0 }对于人msc,没有特殊的交代,你就当贴壁细胞系养就没有任何问题
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报纸
发表于 2012-10-29 21:08 |只看该作者
回复 sysuhoo 的帖子+ M! {- C8 o" A' ~8 {2 K

+ q( l$ ]& V% n$ k9 Q3 s谢谢你!就是人间充质细胞用EDTA的胰酶消化时大概需要多长时间的?因为我们是买的细胞株,好贵的,所以我必须询问相关注意点···
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地板
发表于 2012-10-30 07:49 |只看该作者
人的很好消化,一般不超过5分钟就能下来,放心做吧
' G4 N, \5 L4 C! m. ?9 O不过就我所知,间充质干细胞由于本身的自我更新能力具有增殖能力,所以也不能说是细胞株$ a8 B  b: o+ k# h& V
还是有代数限制的,所以当代数很高以后,多向分化能力会受到影响" d$ M6 a  b1 z* w
建议你在代数较小时提前多冻存,另外传代保种的不要密度太高,否则也会分化
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发表于 2012-10-30 13:47 |只看该作者
回复 zxh_890808 的帖子. E# U; b& t6 N+ R0 ?
; f' f& T+ B% {) W; Z
我们这离心 主要是消化的时候对细胞的损伤大吧
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发表于 2012-10-30 18:32 |只看该作者
回复 sysuhoo 的帖子
; O& _* U' w+ s! Z% D6 w' D4 ]6 j3 @5 V
非常感谢你的意见···呵呵···既然尽早冻存,我这样做可以吗,就是我复苏离心加培养液混匀后,就分为两瓶,等一瓶长得大概百分之八九十就冻存,另外一瓶长得差不多了就传代,然后相继冻存····
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发表于 2012-11-1 10:33 |只看该作者
回复 zxh_890808 的帖子
5 i$ X% c# y& |5 L; b0 s
- C: S+ m! V% U0 Z1 s1 u嗯 你这样做比较保险

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发表于 2012-11-5 20:12 |只看该作者
回复 回到从前 的帖子
. B9 [. a/ p0 B0 D& Q) U' M( m: N
- [6 @  h3 k0 @) _( F1 W请问一下,你们人间充质干细胞冻存时,冻存液成分的比例是什么?!
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