成骨诱导液配置问题，怎么灭菌？

ygxdnh

最近做诱导MSC成骨，配了成骨诱导液，但是加了诱导液的全部染菌。
5 l/ b3 W+ G* f$ B配置方法是：( {6 c* Y2 c: [. E1 J- {
1、按比例称VC和B-甘油酸钠（下面用B代替）
$ D6 D2 H% n" k- r2 `% e2、DEX溶于酒精
. t6 q/ L6 b9 N6 u& `% j3、在α-MEM中加入VC，B,及DEX，这时培养基变黄（不知道大家配出来是否是黄色），再用0.2mm的过滤器过滤。
' r7 t5 l7 u8 G最后加入孔板。但是都染菌了。大家配置诱导液是怎么灭菌的，按道理说用了0.2mm的过滤器应该不会染菌吧？

ygxdnh

回复 sdyinong 的帖子* r9 {! k" ~; ^0 ?# C, ~

( [6 E( O3 @5 J: |9 _6 o8 i如果我把VC，B，DEX都溶于PBS（少量），然后再过滤，最后加入到无菌的培养基里面，可否？

ygxdnh

stang198651 发表于 2012-11-8 12:34 ; P" o7 a' i$ c0 O: S7 p1 b
按理论过了0.2um就无菌了，但在实际操作中会存在很多意外，一般情况下，过滤完最好能做个无菌试验，以确认无 ...

% a0 Y9 J* j  W6 R! x( e9 F
我也觉得可能是操作原因。

ygxdnh

回到从前 发表于 2012-11-8 12:43
9 e! ~2 b: M* ^8 P你好 还做别的鉴定吗？

4 e+ W* W3 l, C" X3 Q+ \没有，我们这边主要做材料，细胞只是做个评价，没有做那么多鉴定。

ygxdnh

jenvy121 发表于 2012-11-8 14:23
) H0 Z1 d( _  `/ I# o0.22滤器过滤不会污染了，肯定是操作过程中出现了问题，亦或是你的过滤就是不正确的操作导致溶液污染，先进 ...

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谢谢