鼠ADSC传代问题

loveless

  请问各位，原代培养多久就可以传代了？说是长满80~90%，可是长得不均匀怎么判断能不能传代？有些地方长得很密集，有些地方长得很少甚至是空白的，这样能传代么？谢谢各位，还请不吝赐教~~~

meister

回复 loveless 的帖子# C3 z4 `$ X3 ^( }0 E7 [
3 i" g! z3 m  N2 Q3 k: ~
方法，材料， 给大家看看， 帮你找找问题所在

loveless

回复 meister 的帖子3 N- C" v- M$ b' \9 ^- Q' R
! G! P( F- W5 q
我都是按照文献上的方法分离的呀，培养基用的是低糖的，应该没什么问题吧~~~

meister

: b' l1 d, @) z; d# y) W! B
' O! O9 ]% u7 \4 {" l. g$ h
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6 _/ O; j. R: W5 p; d) ^
4 f; Q8 d! T0 q$ B9 {那是你分离的有问题，或者培养基不对， P0应该生长的很快

loveless

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8 @$ y; U) g" I( T4 h3 E! h8 D
9 J( ^& P  r$ P1 e$ r3 y这样啊~可是怕细胞坚持不到P2代~~我P1都传了有3天了，没见动静····

meister

回复 loveless 的帖子* d/ U9 `8 {: ?! V1 h$ }
9 V$ b8 t# u$ i. i
p1代死细胞较多， p2就好了

meister

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5 f8 [& _5 H8 h7 E" |+ V1 W- @- l9 W  L) ^+ K+ j
有悬浮细胞是正常的

meister

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: \5 Q3 o' D' o# \9 T' T
+ f7 P! A* E9 z  O5 l死细胞了， 也许是贴壁原因， 也许是培养条件， 也许-----

loveless

回复 your1024 的帖子) V6 R6 R; F  O3 n& e
; h9 z+ ~4 m; V1 D: x
我的消化时间都是小于2分钟的，也尽量吹打成单细胞悬液，可是传代以后细胞长得不怎么好，2d后还悬浮着好多圆圆的细胞。

loveless

回复 jiguojie87 的帖子
" o$ J0 x2 `. ^" C  E& }/ c+ K' q8 f
我把消化法和组织块法长出来的细胞都传了一代，2d后细胞贴壁组织块那瓶比较多，消化法那瓶就很少，但是两瓶里面都悬浮着很多圆圆的细胞，不知道是死还是活的。（我估计应该是死了，不然也该贴壁了。可是为什么会有那么多悬浮着呢？）