[求助]小鼠胚胎干细胞体外定向诱导技术求助

yedanna

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你的拟胚体形态看起来还不错的。转到板里培养的时候，前面2天最好没碰，否则影响贴壁。我用的4孔板培养，每个孔放3-4个拟胚体。拟胚体的数量会影响其贴壁。培养基的PH问题不大，我们实验室很少测PH的，粉剂溶解后过滤，直接用了。

yedanna

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2 J+ N* h5 c, A前面两天，不要动培养皿，也不要换液。2-3个EB/孔，也不多，合适了。+ _# `9 r4 t' n1 P1 t) `7 j2 U* {/ U
你能具体说一下你的培养方法吗，看看原因到底出在哪里

yedanna

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你们用的是无滋养层培养胚胎干细胞吧。悬浮两天用什么培养皿，是用细菌级的培养皿吗？悬浮培养才2天就转入24孔贴壁培养了？是不是时间太短了，所以贴壁效果不好，然后影响分化呢？

yedanna

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我们用的都是进口的细菌级培养皿。我一般悬浮7天

yedanna

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3 ]; O) F+ [) z" S: G一般是贴壁培养再使用VC刺激，8-12天一般指的是贴壁培养后的天数，不算悬浮培养的天数