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[求助]小鼠胚胎干细胞体外定向诱导技术求助   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-11-16 21:05 |显示全部帖子
回复 summer0914 的帖子3 ?7 h6 C: h4 H0 K3 A
5 G+ e+ ]: [1 x/ z$ ]6 y3 I3 ]* X
你的拟胚体形态看起来还不错的。转到板里培养的时候,前面2天最好没碰,否则影响贴壁。我用的4孔板培养,每个孔放3-4个拟胚体。拟胚体的数量会影响其贴壁。培养基的PH问题不大,我们实验室很少测PH的,粉剂溶解后过滤,直接用了。
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沙发
发表于 2012-11-19 18:20 |显示全部帖子
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4 g; S' `; W- l: h
2 J+ N* h5 c, A前面两天,不要动培养皿,也不要换液。2-3个EB/孔,也不多,合适了。+ _# `9 r4 t' n1 P1 t) `7 j2 U* {/ U
你能具体说一下你的培养方法吗,看看原因到底出在哪里
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藤椅
发表于 2012-11-20 18:55 |显示全部帖子
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: m, a/ R2 b  Q9 }( H; c5 f1 _1 [: }+ e9 l* B
你们用的是无滋养层培养胚胎干细胞吧。悬浮两天用什么培养皿,是用细菌级的培养皿吗?悬浮培养才2天就转入24孔贴壁培养了?是不是时间太短了,所以贴壁效果不好,然后影响分化呢?
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板凳
发表于 2012-11-21 17:03 |显示全部帖子
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$ K! |  h' d3 q8 _" n1 A+ }* ]2 O3 e3 }" R$ C% o+ |4 _' L! h/ v
我们用的都是进口的细菌级培养皿。我一般悬浮7天
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报纸
发表于 2012-11-21 17:04 |显示全部帖子
回复 summer0914 的帖子2 y( a  R- M' \6 M; \

3 ]; O) F+ [) z" S: G一般是贴壁培养再使用VC刺激,8-12天一般指的是贴壁培养后的天数,不算悬浮培养的天数
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